[发明专利]嵌合KSAC蛋白的表达和由高压产生可溶性蛋白的方法在审
| 申请号： | 201810318137.X | 申请日： | 2013-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN108578679A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | L·B·菲舍;N·P·Y·卡尔布莱克;F·卢克斯 | 申请（专利权）人： | 梅里亚有限公司 |
| 主分类号： | A61K38/17 | 分类号： | A61K38/17;A61K38/45;A61K38/48;A61K39/008;A61P33/02;C07K19/00 |
| 代理公司： | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人： | 张小勇 |
| 地址： | 美国*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 蛋白 嵌合 可溶性蛋白 高压产生 免疫原性 原核生物 真核生物 抗原性 折叠的 解聚 施用 疫苗 制造 | ||
1.组合物，其包含由利什曼原虫抗原动体目原生动物膜蛋白11(KMP11)、甾醇甲基转移酶(SMT)、A2和半胱氨酸蛋白酶(CP)组成的融合蛋白。
2.权利要求1的组合物，其中所述融合蛋白与SEQ ID NO:2具有至少90％序列同一性。
3.权利要求1的组合物，其中所述融合蛋白由与SEQ ID NO:1具有至少90％序列同一性的多核苷酸编码。
4.权利要求1～3之任一项的组合物，其中所述融合蛋白基本上溶解于水溶液或基本上再折叠。
5.权利要求1～3之任一项的组合物，其中所述融合蛋白由高压溶解或再折叠。
6.权利要求5的组合物，其中所述高压是约1000巴～约5000巴。
7.权利要求6的组合物，其中所述高压施加至少20小时。
8.权利要求1～7之任一项的组合物，其中所述融合蛋白自大肠埃希氏菌(E.coli)包含体溶解或再折叠。
9.权利要求8的组合物，其中所述大肠埃希氏菌(E.coli)包含体在不包含脲或包含低脲的缓冲剂中制备。
10.权利要求8的组合物，其中所述大肠埃希氏菌(E.coli)包含体在包含二硫代苏糖醇(DTT)的缓冲剂中制备。
11.权利要求9或10的组合物，其中所述大肠埃希氏菌(E.coli)包含体还经历约1000巴～约5000巴的高压。
12.权利要求11的组合物，其中所述大肠埃希氏菌(E.coli)包含体在高压下处理约20小时～约100小时。
13.权利要求12的组合物，其中所述大肠埃希氏菌(E.coli)包含体以约83巴/hr～125巴/hr的速度减压。
14.权利要求5～13之任一项的组合物，其中所述高压逐步增加。
15.治疗对利什曼原虫感染敏感的动物的方法，其包括给动物施用包含由利什曼原虫抗原动体目原生动物膜蛋白11(KMP11)、甾醇甲基转移酶(SMT)、A2和半胱氨酸蛋白酶(CP)组成的融合蛋白的组合物。
16.通过在动物中诱导针对利什曼病的免疫应答来预防利什曼病的方法，其包括给动物施用包含由利什曼原虫抗原动体目原生动物膜蛋白11(KMP11)、甾醇甲基转移酶(SMT)、A2和半胱氨酸蛋白酶(CP)组成的融合蛋白的组合物的步骤。
17.权利要求15或16的方法，其中所述融合蛋白与SEQ ID NO:2具有至少90％序列同一性。
18.权利要求15或16的方法，其中所述融合蛋白由与SEQ ID NO:1具有至少90％序列同一性的多核苷酸编码。
19.权利要求15或16的方法，其中所述动物是犬科动物。
20.产生在原核生物或真核生物中表达的可溶性蛋白的方法，其包括下列步骤：
(i)在不包含脲或包含低浓度的脲的缓冲剂中制备大肠埃希氏菌(E.coli)包含体以形成包含体悬浮液；以及
(ii)使包含体悬浮液经历高压。
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