[发明专利]一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒及其检测方法在审
申请号: | 201810318417.0 | 申请日: | 2018-04-04 |
公开(公告)号: | CN110346575A | 公开(公告)日: | 2019-10-18 |
发明(设计)人: | 张宇;王建国;韩国志 | 申请(专利权)人: | 南京东纳生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/533 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211112 江苏省南京市江宁区龙眠*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 同型半胱氨酸 荧光免疫层析 检测 检测试剂 缓冲液 试纸条 稳定剂 同型半胱氨酸甲基转移酶 聚苯乙烯荧光微球 生物素化抗体 腺苷甲硫氨酸 二硫苏糖醇 干扰因素 基于竞争 生物素化 检测线 结合垫 竞争式 试剂盒 吸水纸 样品垫 质控线 包被 腺苷 样本 | ||
1.一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒,其特征在于:包含试剂I、试剂II和荧光免疫层析试纸条三个部分,其中试剂I含有二硫苏糖醇、腺苷甲硫氨酸、同型半胱氨酸甲基转移酶、缓冲液、稳定剂;试剂II含有亲和素修饰聚苯乙烯荧光微球、缓冲液、稳定剂;荧光免疫层析试纸条包括五部:样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水纸及PVC胶板,腺苷同型半胱氨酸的生物素化抗体固定在结合垫上,硝酸纤维素膜上固定有腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物和二抗作为检测线和质控线,通过竞争法定量检测由同型半胱氨酸转化形成的腺苷同型半胱氨酸。
2.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒,其特征在于:
每升试剂I溶液中各组分的含量是:
每升试剂II溶液中各组分的含量是:
亲和素修饰的聚苯乙烯荧光微球 0.05~5g/L
缓冲液 5~100mM
稳定剂 0.01~10%
每厘米荧光免疫层析试纸条各组分的含量是:
生物素化腺苷同型半胱氨酸抗体 1~4μL/cm
腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物 0.5~2μL/cm
二抗 0.5~2μL/cm
3.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒,其特征在于,
每升试剂I溶液中各组分的含量是:
每升试剂II溶液中各组分的含量是:
亲和素修饰的聚苯乙烯荧光微球 0.1-1g/L
缓冲液 10-15mM
稳定剂 0.1-0.3%
每厘米荧光免疫层析试纸条各组分的含量是:
生物素化腺苷同型半胱氨酸抗体 2-3μL/cm
腺苷同型半胱氨酸-牛血清白蛋白结合物 1-1.5μL/cm
二抗 0.8-1μL/cm
4.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒,其特征在于:所述的稳定剂为叠氮钠、叠氮锂、PC300、苯甲酸钠、山梨酸钾、对羟基苯甲酸丙酯、聚乙二醇、聚乙烯醇、乙二胺四乙酸二钠中的一种或几种。
5.根据权利要求2所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒,其特征在于:所述缓冲液为PBS、PB、Tris中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸荧光免疫层析检测试剂盒的检测方法为:将样本(10-50μL)与试剂I(10-50μL)混合,反应10-30分钟,所得溶液与试剂II(900-980μL)混合,取100μL该混合样本加样到试纸条上,5-15分钟后在荧光免疫定量分析仪上读取检测线的荧光信号值,得到对应的同型半胱氨酸样本含量。
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