[发明专利]G蛋白偶联受体87促进JAK/STAT3信号传导的方法

说明书

本发明属于医疗技术领域，公开了一种G蛋白偶联受体87在胰腺导管腺癌中促进JAK/STAT3信号传导的方法，采用细胞培养，组织标本，蛋白质印迹分析，微阵列数据处理和可视化，质粒产生，免疫沉淀，球体形成，流式细胞术分析，肿瘤异种移植物，EMSA实验，统计分析进行实验。本发明表明在PDA中GPR87显着上调，并且与原发性PDA中总体存活较短相关。发现GPR87被STAT3诱导并直接与JAK2结合，导致STAT3的超活化和CSC群体在PDA中的体外和体内增殖。同时通过与JAK2的相互作用将GPR87鉴定为促进PDA中持续STAT3激活的调节剂。这些发现支持了表观遗传事件在癌症进展中的功能和临床意义。

技术领域

本发明属于医疗技术领域，尤其涉及一种G蛋白偶联受体87在胰腺导管腺癌中促进JAK/STAT3信号传导的方法。

背景技术

胰腺导管腺癌(PDA)是最致命的恶性肿瘤之一。PDA诊断后，约有25％的患者存活至1年，而5年生存率降至5％。不良临床结果是早期难以诊断PDA，侵袭性表型和缺乏有效治疗选择的结果。最近的进展表明，针对癌症干细胞(CSCs)的其他治疗策略可以提高传统疗法对实体瘤的效率。JAK/STAT3信号通路的过度激活与各种人类癌症预后不良有关。越来越多的证据表明JAK/ STAT3信号在维持CSCs群体中起重要作用。据报道，JAK/STAT3途径的活化通过上调NANOG诱导肝CSCs的自我更新和肿瘤起始。在成胶质细胞瘤中维持肿瘤干细胞样表型需要JAK/STAT3途径的组成型激活.AGK过度表达维持了 JAK/STAT3通路的激活，并导致食管鳞状细胞癌中CSC细胞群的增加。此外，已经证明STAT3有助于PDA发育不同阶段的肿瘤发生和发展。G蛋白偶联受体87(GPR87)属于G蛋白偶联受体(G蛋白偶联受体)，GPCRs是一类被认为是治疗性干预的主要靶点，因为它们能够维持人类癌细胞的活力。GPR87的过度表达，调节CD133并促进CSC相关的肝癌迁移和侵袭。最近的一项研究显示，膀胱癌患者复发率较高与GPR87阳性肿瘤有关。然而，GPR87的临床意义及其参与肿瘤发生的分子机制仍不清楚。在此，本发明报道了GPR87在PDA 中显着上调，并且与在原发性PDA中总体存活较短相关。此外，发现GPR87 被STAT3诱导并直接与JAK2相互作用，导致STAT3的超活化和CSC群体在 PDA中的体外和体内增殖。这些结果确定了导致在PDA中持续STAT3激活的调节机制，从而支持表观遗传事件在癌症进展中的功能和临床意义。

综上所述，现有技术存在的问题是：癌症干细胞被认为有助于抵抗化疗和放疗，导致与胰腺癌相关的不良预后。尽管持续的JAK2/STAT3活化与癌症干细胞群体的维持有关，但对这一过程涉及的机制仍然不清，该发明提供了一种G 蛋白偶联受体87在PDA中促进JAK/STAT3信号传导的方法，为PDA的诊断及有效治疗提供了理论依据。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种G蛋白偶联受体87在胰腺导管腺癌中促进JAK/STAT3信号传导的方法。

本发明是这样实现的，采用细胞培养，组织标本，蛋白质印迹分析，微阵列数据处理和可视化，质粒产生，免疫沉淀，球体形成，流式细胞术分析等实验方法，检测GPR87在PDA中的表达情况及其与PDA中总体存活率之间的关系、GPR87与JAK/STAT3信号传导通路之间调控关系，体内、外实验验证GPR87 在PDA中的重要作用，选取两株胰腺导管腺癌细胞系进行后续实验。包括以下步骤：

步骤一，细胞培养；

步骤二，组织标本；

贵州医科大学附属医院提供了2000年至2006年期间收集的121个石蜡包埋的PDA封存标本。样品获自手术切除的肿瘤患者的临床和组织病理学诊断与 PDA，并通过病理学检查证实。

步骤三，蛋白质印迹分析；