[发明专利]一种用于检测肾癌中嫌色细胞癌亚型的基因检测试剂盒在审
| 申请号： | 201810322557.5 | 申请日： | 2018-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN108251533A | 公开（公告）日： | 2018-07-06 |
| 发明（设计）人： | 蒋灵锋 | 申请（专利权）人： | 蒋灵锋 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 赵超 |
| 地址： | 214023 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 细胞癌 亚型 甲基化 位点 基因检测试剂盒 检测 正常组织 肾癌 诊断 非甲基化 特异性强 细胞癌癌 准确率 引物 样本 基因 | ||
【权利要求书】：
1.一种诊断肾癌中嫌色细胞癌亚型的基因检测试剂盒，其特征在于：含有用于检测基因ENST00000571911在74bp～165bp位点完全甲基化的引物。
2.根据权利要求1所述的基因检测试剂盒，其特征在于：所述引物的上游序列如Sequence NO.11所示，下游序列如Sequence NO.12所示。
3.根据权利要求1所述的基因检测试剂盒，其特征在于：还含PCR反应所需酶和试剂。
4.一种诊断肾癌中嫌色细胞癌亚型的方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤S1，取肾癌患者原发灶组织于液氮保存备检；
步骤S2，检测前取出原发灶组织，采用酚/氯仿抽提法提取组织中总DNA；
步骤S3，取2μg总DNA用2mol/LNaOH变性处理，于10mmol/L氢醌和3mol/L亚硫酸氢钠中50℃反应12～16h，处理后的DNA用Wizard DNA纯化试剂进行纯化；
步骤S4，使用用于检测基因ENST00000571911在74bp～165bp位点完全甲基化的引物对纯化后的DNA进行PCR扩增，扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳，用UV凝胶电泳成像及图像分析系统进行图像分析，若扩增出目的条带则判定为嫌色细胞癌亚型。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述引物的上游序列如Sequence NO.11所示，下游序列如Sequence NO.12所示。
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