[发明专利]一种肺炎支原体抗原检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种肺炎支原体抗原检测试剂盒，包括盒体，盒体内设有检测卡和样本提取液瓶；检测卡包括卡盖、卡体和试纸条，试纸条依次设有样品垫层、胶体金层、硝酸纤维素膜和吸水层，样品垫固相生物素标记抗肺炎支原体单克隆抗体A，胶体金层固相抗肺炎支原体单克隆抗体B；硝酸纤维素膜依次设有包被链霉亲和素的检测线和包被羊抗鼠IgG抗体的质控线。本发明还涉及该试剂盒的制备方法；本发明中的检测试剂盒灵敏度高，可以检测到咽拭子样本中的肺炎支原体抗原。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体涉及一种肺炎支原体抗原检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

肺炎支原体(Mycoplasma pneumonia)是介于细CFU与病毒之间，能独立生活的最小微生物，大小为200nm。它由口、鼻分泌物经空气传播，引起散发和小流行的呼吸道感染，主要见于儿童和青少年，现在发现在成人中亦非少见，秋冬季较多。支原体肺炎是肺炎支原体引起的急性呼吸道感染伴肺炎，约占非细CFU性肺炎的1/3以上，或各种肺炎的10％，严重的支原体肺炎也可导致死亡。

由于支原体培养的困难，临床上常用的肺炎支原体的检测主要是血清学检测。人在初次感染肺炎支原体时，会先后产生的IgM抗体和IgG抗体，由于抗体持续在体内存在，因此血清学检测不适用于早期诊断，可作为回顾性诊断。

用分离培养和检测抗体的方法均不能达到早期诊断的目的。而抗原检测可做到早期快速诊断，即检测痰、咽拭子、支气管灌洗液中的肺炎支原体抗原。目前已使用的方法有ELISA、聚合酶链反应(PCR)法。但由于条件所限，国内目前还未普及。尤其是PCR法由于存在试剂问题、污染问题，因此在结果判断上一定要慎重。由于肺炎支原体抗原仅存在于咽拭子、痰液、支气管中，这些样本干扰物质较多，且肺炎支原体含量较低，常规胶体金法很难检测到。本发明针对现有技术存在的问题，提供一种肺炎支原体抗原检测试剂盒，利用样本提取液可分离干扰物质并提取肺炎支原体有效成分，使用生物素-亲和素放大系统以显著提高试剂灵敏度，从而检测到咽拭子样本中的肺炎支原体抗原。

发明内容

本发明的目的在于是：针对现有技术存在的不足，提供一种肺炎支原体抗原检测试剂盒，该检测试剂盒灵敏度高，可以检测到咽拭子样本中的肺炎支原体抗原。

为了实现上述目的，本发明的技术方案是：

一种肺炎支原体抗原检测试剂盒，包括盒体，所述盒体内设有检测卡和样本提取液瓶；所述检测卡包括卡盖、卡体和试纸条，所述试纸条依次设有样品垫层、胶体金层、硝酸纤维素膜和吸水层；所述样品垫层固相生物素标记抗肺炎支原体单克隆抗体A，所述胶体金层固相抗肺炎支原体单克隆抗体B；所述硝酸纤维素膜依次设有包被链霉亲和素的检测线和包被羊抗鼠IgG抗体的质控线。

作为一种优选的技术方案，所述样本提取液瓶内的提取溶液由牛血清白蛋白、叠氮钠以及曲拉通X-100配制而成。

作为一种改进的技术方案，每100mL提取溶液中含有0.5～1g/mL的牛血清白蛋白10～15mL和0.03～0.05g/mL的叠氮钠1～3mL。

本发明的另一个目的是提供一种灵敏度更高的肺炎支原体抗原检测试剂盒的制备方法。

为了实现上述发明的目的，本发明的技术方案是：

一种肺炎支原体抗原检测试剂盒的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)样本提取液的配制

取0.5～1g/mL的牛血清白蛋白10～15mL和0.03～0.05g/mL的叠氮钠1～3mL，用0.3～0.5g/mL曲拉通X-100定容至100mL，得到样品提取液；

(2)胶体金的制备及标记