[发明专利]一种用于包载抗肿瘤药物的还原响应型纳米材料的制备方法

权利要求书

1.一种用于包载抗肿瘤药物的还原响应型纳米材料的制备方法，其特征在于具体过程为：

（1）以不同分子量的聚乙二醇单甲醚和二溴异丁酰溴为原料合成大分子引发剂，随后在溴化亚铜和五甲基二乙基三胺存在的条件下通过原子转移自由基聚合方法合成两亲嵌段聚合物MPEG-b-PtBA，再通过酸解得到嵌段聚合物MPEG-b-PAA；

（2）用硅烷偶联剂氨丙基三乙氧基硅烷对HNTs表面进行共价修饰，在HNTs表面接入氨基后与丁二酸酐反应在末端引入羧基，再与胱胺反应在HNTs表面引入双硫键基团；

（3）通过溶液法将末端含氨基的双硫键-HNTs和嵌段聚合物MPEG-b-PAA通过静电作用相互结合得到用于药物输送的还原响应型HNTs-PAA-MPEG纳米材料。

2.根据权利要求1所述的用于包载抗肿瘤药物的还原响应型纳米材料的制备方法，其特征在于具体步骤为：

（1）MPEG-Br的合成，将干燥MPEG溶解在无水四氢呋喃中，再加入三乙胺，在冰水浴并搅拌条件下滴加2-溴异丁酰溴，2-溴异丁酰溴滴加完后于0℃反应0.5h，接着在室温下反应12h，再依次升温至20℃和35℃分别反应12h，反应完全后抽滤得到浅黄色滤液，该滤液旋蒸得到浅黄色残留物，用干燥二氯甲烷溶解，并在乙醚中沉淀，所得粗产物再经两次溶解、过滤、沉淀后于35℃真空干燥得到产物，该产物标记为MPEG-Br；

（2）MPEG-b-PtBA的合成，在安培瓶中分别加入MPEG-Br、配体五甲基二乙基三胺、丙烯酸叔丁酯和丙酮，反应体系通过冷冻、抽气、解冻循环两次，加入CuBr，随后将反应体系再通过冷冻、抽气、解冻循环三次，密闭后置于60℃油浴中反应，然后取出安培瓶并将其投入液氮中以终止反应，粗产物溶解于四氢呋喃后，在中性氧化铝柱填料中过滤除去带颜色的二价铜离子得到浅黄色滤液，滤液浓缩后于60℃抽真空除去未反应的丙烯酸叔丁酯，随后将所得的粘稠物用N,N-二甲基甲酰胺溶解，装入2000Da透析袋中透析3天，用丙酮将其中水透出，剩余的液体转移至圆底烧瓶中旋蒸除去溶剂得到淡黄色粘稠产物，该产物标记为MPEG-b-PtBA；

（3）酸解，将MPEG-b-PtBA溶解在无水二氯甲烷中，在0℃搅拌条件下加入三氟乙酸，再于0℃反应3h后置于室温下继续搅拌反应，反应完全后旋蒸除去溶剂，再用DMF溶解后装入3500Da透析袋中透析，然后通过真空冷冻干燥得到MPEG-b-PAA；

（4）HNTs-NH₂的合成，称取1.000g的无水HNTs于100mL圆底烧瓶中，加入12mL无水甲苯，剧烈搅拌2h，再加入4mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷，超声分散30min，待分散均匀后置于120℃油浴锅中回流反应24h，在回流过程中用氯化钙干燥管保持干燥无水环境，反应结束后将固体以8000rpm离心分离，并用甲苯反复洗涤以除去未反应的3-氨丙基三乙氧基硅烷，所得固体产物置于真空干燥箱中于40℃干燥48h，所得产物标记为HNTs-NH₂；

（5）HNTs-COOH的合成，称取0.907g的HNTs-NH₂于100mL圆底烧瓶中，加入30mL干燥N,N-二甲基甲酰胺，超声分散30min，称取3.008g的丁二酸酐加入到分散液中，室温反应24h，反应结束后将固体以8000rpm离心分离，并用乙醇反复洗涤以除去未反应的丁二酸酐，所得固体产物置于真空干燥箱中于40℃干燥48h，所得产物标记为HNTs-COOH；

（6）HNTs-S-S-NH₂的合成，称取0.869g的HNTs-COOH于100mL圆底烧瓶中，加入40mL新制MES缓冲液，超声分散30min，称取0.891g的碳化二亚胺加入到分散液中，待搅拌溶解后加入0.276g的N-羟基琥珀酰亚胺，搅拌溶解15min，逐滴加入胱胺和MES的混合液，该混合液是称取0.901g的胱胺二盐酸盐溶解于5mL的MES缓冲液中制得的，室温反应8h，反应结束后将固体以8000rpm离心分离，并用乙醇反复洗涤，所得固体产物置于真空干燥箱中于40℃干燥48h，所得产物标记为HNTs-S-S-NH₂；

（7）HNTs-PAA-MPEG的合成，称取0.082g的HNTs-S-S-NH₂于10mL离心管中，加2mL的乙醇，超声分散10min，将0.078g的MPEG-b-PAA溶解在2mL乙醇中，然后转移到上述离心管中，室温搅拌48h，搅拌结束后将固体以8000rpm离心分离，并用乙醇反复洗涤，所得固体产物置于真空干燥箱中于40℃干燥48h得到用于药物输送的还原响应型纳米材料HNTs-PAA-MPEG。