[发明专利]脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法在审
| 申请号： | 201810336542.4 | 申请日： | 2018-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN108593917A | 公开（公告）日： | 2018-09-28 |
| 发明（设计）人： | 付朋;赵洪洋;易东晔;项炜;蔡晓立;张庆;薛冰洲;王羡科;王旋;熊南翔;姜晓兵 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院 |
| 主分类号： | G01N33/574 | 分类号： | G01N33/574;G01N15/14;G01N33/48;C12Q1/6837 |
| 代理公司： | 杭州千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 裴金华 |
| 地址： | 430000 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 血管 间充质干细胞 脑胶质瘤 肿瘤血管 检测 细胞检测 细胞通过 细胞 修饰 基因芯片技术 细胞因子检测 流式细胞术 免疫荧光法 靶向治疗 分化诱导 关键细胞 生物特性 细胞分化 血管生成 因子检测 管结构 胶质瘤 比对 诱导 试验 开发 | ||
1.脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）将脑胶质瘤相关间充质干细胞进行血管周细胞诱导分化；
（2）将脑胶质瘤相关间充质干细胞来源血管周细胞检测，包括免疫荧光法、流式细胞术、westen-blot assay和血管生成试验；
（3）将脑胶质瘤相关间充质干细胞来源血管周细胞通过ELISA实验进行细胞因子检测；
（4）将脑胶质瘤相关间充质干细胞来源血管周细胞通过基因芯片技术进行miRNA修饰检测。
2.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：所述脑胶质瘤相关间充质干细胞还要进行CCK8测试和划痕试验。
3.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：所述脑胶质瘤相关间充质干细胞采用的培养基为DMEM。
4.如权利要求3所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：所述DMEM中包含胎牛血清、青霉素和链霉素。
5.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：步骤（1）中的分化阶段采用U87细胞培养液。
6.如权利要求5所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：所述U87条件培养液包括无血清培养基和10%血清培养基。
7.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：步骤（1）中包括脂肪细胞分化和骨细胞分化。
8.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：步骤（2）所述的westen-blot assay中采用的抗体为α-SMA、Desmin或NG2中至少两种。
9.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：步骤（3）中所述ELISA检测的细胞因子为VEGF、PDGF-β、TGF-β和FGF2。
10.如权利要求1所述脑胶质瘤相关间充质干细胞参与肿瘤血管拟态的检测方法，其特征在于：步骤（4）中采用的FlashTag Biotin HSR RNA试剂盒进行标记。
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