[发明专利]一种从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法有效
| 申请号： | 201810339497.8 | 申请日： | 2018-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN108484665B | 公开（公告）日： | 2020-06-23 |
| 发明（设计）人： | 薛亚平;郑裕国;郭宇星;徐建妙;程峰 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C07F9/30 | 分类号： | C07F9/30 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;李世玉 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 转化 分离 提取 草铵膦 方法 | ||
1.一种从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法，其特征在于所述方法为：
(1)预处理：取含L-草铵膦的酶转化液减压浓缩至原体积的10-50％后调节pH值至2-5，在0-25℃搅拌析晶，过滤，取滤液调节pH值至1-6，获得预处理液；
(2)离子交换法：将步骤(1)获得的预处理液采用强酸型阳离子交换树脂进行柱层析，先用超纯水冲洗4BV，再用1-2mol/L氨水以0.5-2.0BV/h流速洗脱，收集含L-草铵膦的流出液；强酸型阳离子交换树脂为下列型号之一：001x7、001x8、D072、HD-8、D061、HZ-016或D001cc；
(3)结晶：将步骤(2)含L-草铵膦的流出液减压浓缩，用重结晶溶液结晶，收集晶体，冷冻干燥，获得L-草铵膦；所述重结晶溶液是将聚丙烯酰胺溶于水和丙酮混合而成，其中水与丙酮体积比为1:9，水和丙酮总体积以聚丙烯酰胺重量计为100-1000ml/g。
2.如权利要求1所述从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法，其特征在于步骤(1)减压浓缩温度为50-65℃。
3.如权利要求1所述从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法，其特征在于步骤(2)所述柱层析所用离子交换柱高径比为2-20:1，上样流速为0.5-2.0BV/h。
4.如权利要求1所述从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法，其特征在于步骤(3)所述结晶的方法为：将步骤(2)L-草铵膦流出液减压浓缩至恒重，用重结晶溶液在0-25℃搅拌析晶，过滤，取晶体冷冻干燥，获得L-草铵膦。
5.如权利要求1所述从酶转化液中分离提取L-草铵膦的方法，其特征在于所述L-草铵膦的酶转化液中含30-100g/L L-草铵膦。
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