[发明专利]一种白酒中八种生物胺的UPLC-MS/MS检测方法

权利要求书

1.一种白酒中八种生物胺的UPLC-MS/MS检测方法，其特征在于：

待测酒样首先利用旋转蒸发仪旋蒸除醇后，经BEH Amide柱进行梯度洗脱分离，利用UPLC-MS/MS的SIR模式采集数据，ESI正离子模式下监测，将获得的待测样品谱图与标准谱图对比，保留时间相同的即为对应物质，通过标准曲线线性回归方程对各生物胺进行定量；包括如下步骤：

步骤1：前处理

利用旋转蒸发仪蒸发除去待测酒样中的乙醇，白酒中含有的乙醇较多，如果在前处理中不去除乙醇，将产生基质效应，影响白酒中生物胺的定量分析；将旋蒸除醇后的残液转移至容量瓶中，用超纯水定容至20mL，过0.22μm水相滤膜，备用；

步骤2：色谱条件

色谱柱：BEH Amide柱，1.7μm，2.1×100mm，

柱温：30℃，

进样量：2ul，

流动相：流动相A—乙腈，流动相B—pH＝3的甲酸铵溶液(100mmol)；梯度洗脱；流速0.45ml/min；

步骤3：质谱检测条件

SIR模式；

ESI正离子检测模式；

离子源温度：120℃；

脱溶剂气温度：600℃；

脱溶剂气流量：1000L/h；

锥孔气流量：50L/h；

步骤4：标准品的配制

分别配制1g/L的腐胺、尸胺、组胺、酪胺、苯乙胺、色胺、亚精胺及精胺的标准溶液，溶剂为乙腈-水溶液，将八种生物胺的标准溶液混合并逐级稀释，获得不同浓度的混合标准品溶液；

步骤5：标准谱图与标准曲线的绘制

将步骤4配制的不同浓度的混合标准品溶液进行色谱洗脱分离，利用SIR模式进行采集，获得八种生物胺标准品的标准谱图，以每种生物胺的峰面积为纵坐标，该标准品的浓度为横坐标，获得相应生物胺的标准曲线；

步骤6：待测样品的检测

将经步骤1前处理后的待测酒样按照步骤2和步骤3的检测条件进行UPLC-MS/MS分析测定，将获得的待测样品谱图与标准谱图对比，保留时间相同的即为对应物质，通过标准曲线线性回归方程对各生物胺进行定量；

步骤2中，梯度洗脱程序参数设置如下：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：

步骤4中，乙腈-水溶液是由乙腈和水按体积比50:50混合构成。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：

步骤4中，混合标准品溶液中各生物胺的浓度≥50μg/L，逐级稀释获得至少五个不同浓度的混合标准品溶液。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：

步骤6中，为了确保样品的准确性，对比待测样品与标准品中监测离子，如果相同可进一步确定样品中与标准品中为同一物质。