[发明专利]一种积累乙酰氨基葡萄糖的重组枯草芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.一种生产乙酰氨基葡萄糖的重组菌，其特征在于，所述重组菌以枯草芽孢杆菌为宿主，将纯化标签融合到6-磷酸-氨基葡萄糖乙酰化酶N端然后连接到表达载体上，转入宿主中得到，所述纯化标签为HA或cMyc，纯化标签HA的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，纯化标签cMyc的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；所述6-磷酸-氨基葡萄糖乙酰化酶的来源为秀丽隐杆线虫，所述6-磷酸-氨基葡萄糖乙酰化酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.7。

2.一种权利要求1所述重组菌的构建方法，其特征在于，所示方法的具体步骤如下：将纯化标签融合到质粒pP43-CeGNA1上，得到重组表达载体，将所述重组表达载体转化入枯草芽孢杆菌BSGN11，得到积累乙酰氨基葡萄糖的重组枯草芽孢杆菌。

3.应用权利要求1所述重组菌生产乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，所述方法具体步骤为：将重组枯草芽孢杆菌接种于种子培养基中，在35-37℃、200-220rpm下培养6-8 h得到种子液，将种子液以4-6%的接种量转入发酵培养基，于35-37℃、200-220rpm条件下发酵32-48 h。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述种子培养基的成分为：胰蛋白胨 10 g/L，酵母粉 5 g/L，NaCl 10 g/L；所述发酵培养基的成分为：葡萄糖50 g/L，酵母粉 6 g/L，蛋白胨12 g/L，(NH₄)₂SO₄ 6 g/L，K₂HPO₄·3H₂O 15 g/L，MgSO₄ 3 g/L，FeSO₄ 7H₂O 0.06 g/L，CaCl₂·0.06 g/L。