[发明专利]一种家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体、其编码基因及其表达和应用

权利要求书

1.一种家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.一种家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体基因，编码权利要求1所述的家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体。

3.根据权利要求2所述的家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体基因，其特征在于，所述家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体基因序列如SEQ ID NO：2所示。

4.包含权利要求2或3所述的家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体基因的重组载体，所述的重组载体是大肠杆菌重组载体。

5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于，所述重组载体的制作方法如下，将权利要求2所述的肽聚体基因插入到克隆载体pUC19，得到重组质粒pUC19-5×MAF-1A，扩增重组质粒pUC19-5×MAF-1A，然后采用限制性核酸内切酶BamH I和Hind III双酶切扩增所得的重组质粒pUC19-5×MAF-1A，并将酶切得到的5×MAF-1A基因克隆到pET-28a(+)表达载体，使该5×MAF-1A基因位于T7启动子下游并受其调控，得到重组载体pET-28a(+)-5×MAF-1A。

6.包含权利要求2或3所述的家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体基因的重组菌株。

7.一种表达家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)用权利要求4或5所述的重组载体转化大肠杆菌，得到重组菌株；

(2)步骤(1)中得到的重组菌株在摇瓶或发酵罐中进行发酵，诱导家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的表达；

(3)发酵结束后，回收并纯化所表达的家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体，即得。

8.根据权利要求7所述的表达家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的方法，其特征在于，所述步骤(2)中诱导家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的表达的条件为IPTG诱导浓度为0.2～1.0mmol/L，温度为18～36℃，时间为2～24小时。

9.根据权利要求8所述的表达家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的方法，其特征在于，所述步骤(2)中诱导家蝇抗菌肽MAF-1A肽聚体的表达的条件为IPTG诱导浓度为0.8mmol/L，温度为28℃，时间为12小时。