[发明专利]一种美伐他汀的制备方法在审
申请号: | 201810361111.3 | 申请日: | 2018-04-20 |
公开(公告)号: | CN108977474A | 公开(公告)日: | 2018-12-11 |
发明(设计)人: | 陈华桥;张葵 | 申请(专利权)人: | 北大方正集团有限公司;北大医药重庆大新药业股份有限公司;北大医疗产业集团有限公司 |
主分类号: | C12P17/06 | 分类号: | C12P17/06;C12R1/80 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;陈征 |
地址: | 100871 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 美伐他汀 制备 桔青霉 发酵培养基 发酵培养 柠檬酸钠 乙酸钠 菌种 生产成本 生产 | ||
1.一种美伐他汀的制备方法,以桔青霉为菌种,经发酵培养获得美伐他汀,其特征在于,在培养所述桔青霉的发酵培养基中,添加乙酸钠和/或柠檬酸钠。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述发酵培养基包括如下重量份组分:蔗糖18-22份、豆粕3-5份、酵母浸膏0.4-0.6份、蛋白胨0.8-1.2份、NaCl 0.08-0.12份、MgSO4 0.04-0.06份、KH2PO4 0.04-0.06份、NaNO3 0.08-0.12份、水70-80份;
优选地,所述发酵培养基包括如下重量份组分:蔗糖20份、豆粕4份、酵母浸膏0.5份、蛋白胨1份、NaCl 0.1份、MgSO4 0.05份、KH2PO4 0.05份、NaNO3 0.1份、水70-80份。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述乙酸钠的添加量为所述培养基的0.05-1.50%(w/w),优选为0.1-1.0%(w/w),更优选为0.5-0.7%(w/w)。
4.根据权利要求1-3任一项所述的制备方法,其特征在于,添加所述乙酸钠的时间为发酵后的第0-120个小时,优选为发酵后的第0-72个小时,更优选为发酵后的第24-48个小时。
5.根据权利要求1-4任一项所述的制备方法,其特征在于,所述柠檬酸钠的添加量为所述培养基的0.05-1.50%(w/w),优选为0.1-1.2%(w/w),更优选为0.9-1.1%(w/w)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法,其特征在于,添加所述柠檬酸钠的时间为发酵后的第0-120个小时,优选为发酵后的第0-72个小时,更优选为发酵后的第24-48个小时。
7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法,其特征在于,所述发酵培养基中同时添加乙酸钠和柠檬酸钠,添加所述乙酸钠和柠檬酸钠的时间为发酵后的第0-120个小时,所述乙酸钠的添加量为0.05-1.50%(w/w),柠檬酸钠的添加量为0.05-1.50%(w/w);
优选为发酵后的第0-72个小时,所述乙酸钠的添加量为0.1-1.0%(w/w),柠檬酸钠的添加量为0.1-1.0%(w/w);
更优选为发酵后的第40-55个小时,所述乙酸钠的添加量为0.5-0.7%(w/w),柠檬酸钠的添加量为0.5-0.7%(w/w)。
8.根据权利要求1-7任一项所述的制备方法,其特征在于,所述培养的条件为:在pH值为5.5-6.5、温度为20-30℃的条件下,以200-300rpm的转速,发酵培养200-260小时;
优选地,在pH值为6.0、温度为24±1℃的条件下,以240-260rpm的转速,发酵培养220-250小时。
9.根据权利要求1-8任一项所述的制备方法,其特征在于,接种至发酵培养基前还包括将菌种接种至种子培养基中进行预培养;
优选地,所述预培养具体为:将桔青霉菌种接种至种子培养基中,在24-26℃的温度下,以150-300rpm的转速培养96-120小时;
更优选地,所述预培养后的桔青霉种子液按10-20%的接种量接种至发酵培养基中。
10.根据权利要求1-9任一项所述的制备方法,其特征在于,将桔青霉菌种接种至种子培养基中进行预培养,将预培养后获得种子液按10-20%的接种量接种至发酵培养基中,在pH值为5.5-6.5、温度为20-30℃的条件下,以240-260rpm的转速,发酵培养220-250小时;在发酵后的第0-72个小时,向所述发酵培养基中,添加0.1-1.0%(w/w)的乙酸钠和/或柠檬酸钠;
优选为添加0.9-1.1%(w/w)的乙酸钠和/或柠檬酸钠。
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