[发明专利]一种人血清蛋白荧光探针及其制法和用途

说明书

一种人血清蛋白荧光探针及其制法和用途，其特征是它有如下结构：本发明的荧光探针可以快速高选择性的检测人血清蛋白，具有用于临床前检测的潜在可能。本发明公开了其制法，相关活性测试方法与相关活性数据。

技术领域

本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种人血清蛋白荧光探针及其制备方法和用途。

背景技术

人血清蛋白(Human Serum Albumin，HSA)是循环系统中最丰富的转运蛋白，在调节渗透压和运输营养、代谢产物及药物的过程中起关键作用。大量研究表明人血清蛋白的异常表达与多种疾病相关，如：冠心病，多发性骨髓瘤，糖尿病，肾脏疾病，神经系统代谢紊乱，慢性间质性肝炎等，因此它被作为临床前诊断的重要潜在参数。血浆中的人血清白蛋白浓度通常为35～50mg/mL，在血清等生物流体中定量检测HSA已成为预防和治疗的重要手段。

目前检测HSA的方法主要包括蛋白质组学，放射免疫测定，电化学。由于无需昂贵的设备和复杂的制备，荧光探针显示出灵敏度高、选择性好等优点。通常用于检测HSA的荧光探针依赖于几种机制，包括GFP(绿色荧光蛋白)模仿策略，基于纳米粒子的荧光增强，染料结合性成像和小分子位点结合。其中，小分子和HSA的某些特定位点的结合更能实现对HSA相比于分子量更小的牛血清蛋白(Bovine Serum Albumin，BSA)的高选择性。然而，它们仍然面临一些缺陷：如检测系统通常受到介质的极性或粘度的干扰等。

我们提供了一种基于扭转分子内电荷转移(Twisted Intra-molecular ChargeTransfer，TICT)机理的快速和高选择性检测HSA的探针NJUP1。该探针具有较低的细胞毒性，良好的灵敏度和选择性，减少甚至避免了介质极性和粘度的干扰，分子量仅为约300，且仅有一个共轭连接双键，具有良好的生物相容性和检测稳定性。

发明内容

本发明的目的在于减小介质极性和粘度的干扰，提供一种新型的高选择性的快速灵敏检测HSA的小分子荧光探针。

本发明的技术方案是提供一种可与人血清蛋白特异性结合的荧光探针，所述探针为，(反式)-(5-(6-(二甲氨基)喹啉-2-基)亚甲基)-2，4噻唑烷二酮，其结构式为：

本发明的目的还在于提供所述的人血清蛋白荧光探针的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：将4-N，N-二甲基苯胺用溶剂溶解后，加入巴豆醛和甲苯，搅拌并加热回流，冷却后柱层析分离得到中间体化合物B；

步骤二：取二氧化硒，用溶剂溶解后，加入所述中间化合物B，搅拌并加热回流，冷却后柱层析分离获得中间体化合物C；

步骤三：取所述中间体化合物C，用溶剂溶解后，加入2-硫代-2，4-噻唑烷二酮及尿素，搅拌并加热回流，冷却后过滤，用乙醇洗得到所述人血清蛋白荧光探针。

本发明的目的还在于提供所述人血清蛋白荧光探针的用途，将所述人血清蛋白荧光探针应用于定量检测人血清蛋白的含量。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

(1)以喹啉醛为荧光团设计的荧光探针对人血清蛋白的专一性强。

(2)本发明荧光探针自身荧光信号很弱，与人血清蛋白作用后荧光显著增强，并且，具有很高的检测灵敏度。

(3)分子量小，半衰期长。

(4)本发明荧光探针自身的化学性质稳定，无自氧化作用，且与目标物作用迅速。

(5)本发明所提供的制备方法合成路线简单，易于制备，便于推广应用。

本发明人血清蛋白荧光探针性能优异，可为进一步研究细胞中人血清蛋白生物学功能提供了可靠使用的工具。