[发明专利]在体外大量扩增人类成熟高活性树突状细胞的方法及其应用有效
| 申请号： | 201810368646.3 | 申请日： | 2018-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN108546679B | 公开（公告）日： | 2021-04-16 |
| 发明（设计）人： | 于洋 | 申请（专利权）人： | 北京翊博普惠生物科技发展有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0784 | 分类号： | C12N5/0784;C12Q1/02;C12N15/867;C12N5/0783;A61K35/15;A61P35/00;A61P31/12 |
| 代理公司： | 北京慧诚智道知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11539 | 代理人： | 李楠 |
| 地址： | 100192 北京市海淀区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 体外 大量 扩增 人类 成熟 活性 树突 细胞 方法 及其 应用 | ||
1.一种制备成熟高活性树突状细胞的方法，包括：
1)从外周血或脐带血收集单个核细胞；
2)诱导所述单个核细胞分化为树突状细胞；
3)让所述树突状细胞与来自STLV3病毒的Tax蛋白接触；以及
4)筛选和鉴定获得的成熟高活性树突状细胞。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述Tax蛋白能够激活NF-κB、AP1和/或STAT信号通路。
3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述Tax蛋白具有如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列。
4.如权利要求1所述的方法，其中步骤2)包括让所述外周血或脐带血单个核细胞依次接触PHA和IL-2或者让所述外周血或脐带血单个核细胞接触GM-CSF和IL-4。
5.如权利要求1所述的方法，其中步骤3)包括将包含所述Tax蛋白的编码核酸的慢病毒载体引入所述树突状细胞。
6.如权利要求1所述的方法，其中还包括将肿瘤抗原或病毒抗原表达载体引入所述成熟高活性树突状细胞的步骤。
7.通过权利要求1至6中任一项的方法获得的成熟高活性树突状细胞。
8.一种制备细胞毒性T淋巴细胞的方法，包括让权利要求6的方法制备的成熟高活性树突状细胞与来自外周血或脐带血的单个核细胞混合培养，并回收CD3+T细胞。
9.一种制备自然杀伤细胞的方法，包括让权利要求1至5中任一项的方法制备的成熟高活性树突状细胞与来自外周血或脐带血的单个核细胞混合培养，并回收CD3-CD56+NK细胞。
10.一种制备Tγδ细胞的方法，包括让权利要求6的方法制备的成熟高活性树突状细胞与来自外周血或脐带血的单个核细胞混合培养，并回收CD3+TCRγδ+T细胞。
11.权利要求7的成熟高活性树突状细胞在制备抗肿瘤或抗病毒的细胞产品中的应用。
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