[发明专利]半胱氨酸改造的抗体-毒素偶联物

说明书

将目标抗体的重链235位丝氨酸(S)改造为半胱氨酸(C)，并通过此改造后的半胱氨酸的游离巯基(‑SH)与偶联了小分子高活性细胞毒素(Payload)的mc‑vc‑PAB‑OH连接子进行定点偶联，形成均一性优良的半胱氨酸改造的抗体‑毒素偶联物，其毒素比抗体比例(DAR)为1.6‑2.0，此抗体‑毒素偶联物具有通式：2C2‑HC‑S235C‑mc‑vc‑PAB‑payload，同时，本发明还披露了此TDC药物的制备、纯化方法，在表达EGFRvIII及过表达EGFRwt的肿瘤的治疗应用。

技术领域

本发明涉及一种化合物及其制备方法和用途，特别涉及一类半胱氨酸改造的抗体-毒素偶联物（TDC）及其制备方法和用途。

背景技术

表皮生长因子受体EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是一种糖蛋白，属于ErbB受体家族的一种，该家族包括EGFR (ErbB-1), HER2/c-neu(ErbB-2), Her 3(ErbB-3) 和Her 4(ErbB-4)。EGFR是上皮生长因子（EGF）细胞增殖和信号传导的受体，贯通细胞膜，分子量170KDa，靠与配体结合来激活。激活后，EGFR由单体转化为二聚体。EGFR还可能和ErbB受体家族的其他成员聚合来激活，例如ErbB2/Her2/neu。

EGFR通常低量表达于多种正常组织细胞，包括皮肤、肝脏等，与正常生理作用相关。

EGFR过表达与多种肿瘤的发生与发展相关，包括头颈癌、膀胱癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、脑胶质瘤、肾癌、前列腺癌、胰腺癌、乳腺癌（Atalay et al., 2003;Herbst and Shin, 2002）。

多种肿瘤在过量表达野生型EGFR（EGFRwt）的同时也表达突变型的EGFR，EGRFvIII(de2-7 EGFR)。EGRFvIII是EGFRwt第6-273氨基酸缺失的EGFR突变型（Sugawa et al.,1990），介导配体非依赖型的细胞持续活化。EGRFvIII被报道于多种肿瘤中，包括脑胶质瘤、乳腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌和前列腺癌（Wikstrand et al., 1997; OlapadeOlaopa etal., 2000）。EGRFvIII的出现往往预示肿瘤预后不良。

EGRFvIII特异性表达于肿瘤细胞组织中，正常组织细胞不表达EGRFvIII，这为靶向治疗提供了良好的靶点。

抗体-毒素偶联物（Antibody drug conjugate, ADC）是靶向治疗的热点领域，已在美国获批上市的两个药物Adcetris和Kadcyla表现出良好的临床疗效，并且有超过50个ADC药物在进行临床阶段研究。

以EGFRvIII为靶点的通过链间二硫键巯基非定点偶联的ADC药物ABT-414已在美国进行临床II期试验，体现出一定的临床效果，但由于其采用非定点偶联方式，其药物均一性差，对病人造成较严重的毒副作用，限制了其临床用药量，直接影响了其临床治疗效果。

发明内容