[发明专利]一种短链脱氢酶及其突变体与基因的制备及应用有效
| 申请号： | 201810371169.6 | 申请日： | 2018-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN108546690B | 公开（公告）日： | 2021-08-10 |
| 发明（设计）人： | 游松;秦斌;秦凤玉;郭继阳;刘亚林;张飞霆;张文鹤;祝天慧 | 申请（专利权）人： | 沈阳药科大学 |
| 主分类号： | C12N9/04 | 分类号： | C12N9/04;C12N15/53;C12P7/22 |
| 代理公司： | 沈阳飞扬灵睿知识产权代理事务所(普通合伙) 21255 | 代理人： | 靳玲 |
| 地址： | 110016 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 脱氢酶 及其 突变体 基因 制备 应用 | ||
1. 一种短链脱氢酶突变体，其特征在于，在SEQ ID No.2基础上将186位缬氨酸突变为具有较大空间位阻的氨基酸，所述的较大空间位阻的氨基酸为：苯丙氨酸、色氨酸。
2.如权利要求1所述的一种短链脱氢酶突变体，其特征在于，在SEQ ID No.2基础上将186位缬氨酸突变为具有较小空间位阻的氨基酸，将141位谷氨酸突变为非极性氨基酸，将92位甘氨酸突变为具有较大空间位阻的氨基酸或极性氨基酸；所述的较小空间位阻的氨基酸为：丙氨酸，所述的非极性氨基酸为：亮氨酸，所述的具有较大空间位阻的氨基酸为苯丙氨酸，所述的极性氨基酸为：谷氨酸。
3.如权利要求1或2所述的短链脱氢酶突变体，其氨基酸序列如SEQ ID No. 4，6，8，10所示。
4.一种核酸，其特征在于，能够编码权利要求1-3任何一项所述的氨基酸序列。
5.一种表达载体，其特征在于，含有权利要求4中所述的核酸。
6.一种包含权利要求5所述的表达载体的重组表达转化体细胞。
7.一种短链脱氢酶突变体的制备方法，其特征在于，培养权利要求6所述的重组表达转化体细胞，从而获取短链脱氢酶突变体。
8.权利要求1-3任何一项所述的短链脱氢酶突变体或权利要求6所述重组表达转化体细胞作为催化剂催化不对称还原前体酮类化合物，制备光学纯的手性醇的应用。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述不对称还原前体酮结构如结构式1所示：
n = 1, 2；
R1为卤素、卤代C1-C4烷基；
R2为卤素、NO2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基；
R3为卤素、NO2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、ArCH2O、卤代C1-C4烷基；
R4 为卤素、NO2、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤代C1-C4烷基；
R5为卤素、卤代C1-C4烷基；
X为C1-C4烷基、卤代C1-C4烷基。
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