[发明专利]一种检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：包括PCR反应缓冲液A、PRV引物探针混合液B、酶系C、阴性对照、阳性对照。

2.根据权利要求1所述的一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒的各组分含量如下：PCR反应缓冲液A 384μl、PRV引物探针混合液B 48μl、酶系C 96μl、阴性对照400μl、阳性对照400μl。

3.根据权利要求1所述的一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的PCR反应缓冲液A的组分为5×PCR buffer(Mg2+Plus)、dNTPs的混合物，PRV引物探针混合液是由一对伪狂犬引物和一条特异性荧光探针组成，所述的引物序列如SEQID NO:1和SEQ ID NO:2所示，所述的荧光探针的序列如SEQ ID NO:3所示，所述的酶系C的组分为热启动DNA聚合酶、Super M-MLV、RRI的混合物，所述的阴性对照采用DEPC-H2O，所述的阳性对照采用伪狂犬目的基因片段的质粒菌。

4.根据权利要求1所述的一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的引物序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2为：

SEQ ID NO:1：上游引物CAAGTTCAAGGCCCACATCTA

SEQ ID NO:2：下游引物GTCYGTGAAGCGGTTCGTG；

所述的探针序列为：

SEQ ID NO:3：ACGTCATCGTCACGACCGTGT。

5.根据权利要求1所述的一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒，其特征在于：所述的引物序列SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的扩增序列和序列SEQ ID NO:3的探针引物浓度均为10uM/ul，扩增引物与探针引物配比为2:2:1。

6.根据权利要求1所述的一种用于检测伪狂犬病毒的Taqman实时荧光PCR试剂盒的荧光PCR反应体系，其特征在于：具体如下：

扩增体系：