[发明专利]一种以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法有效
申请号: | 201810376924.X | 申请日: | 2018-04-25 |
公开(公告)号: | CN108719054B | 公开(公告)日: | 2019-10-29 |
发明(设计)人: | 刘倩倩;刘维信 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 王晓晓 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 腋芽 外植体 大白菜 切下 植物生长调节物质 琼脂固体培养基 繁育 芽增殖培养基 不定根诱导 增殖培养基 花盆基质 育种材料 育种进程 再生效率 种质资源 自然光照 组织培养 基因型 基因组 芽原基 再生苗 增殖的 灭菌 扩繁 蘸取 增殖 清洗 转入 再生 优化 | ||
1.一种以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于包括以下步骤:
1)选取结球期大白菜,剥去叶球外叶,将叶柄基部与短缩茎连接处的腋芽切下;
2)在无菌条件下,先用酒精进行表面消毒,无菌水漂洗;再倒入NaClO溶液灭菌,无菌水漂洗;漂洗结束后,吸干腋芽的多余水分;灭菌后,将腋芽基部多余的短缩茎组织切除;
3)将腋芽的芽尖向上置于芽增殖培养基上进行培养;
4)腋芽在培养基中培养28d后,转入新的芽增殖培养基中继代培养;将外植体上增殖的长度大于1.5cm的具有独立生长点的再生芽切下;
5)将切下的再生芽基部在过滤灭菌的IBA溶液中浸蘸后,插入装有固体生根基质的培养瓶中,封好瓶盖,进行生根培养;
6)当再生芽高度大于3cm时,打开培养瓶盖炼苗,将再生苗连同瓶中的基质一同转入花盆基质中,将再生植株置于室温下,给予自然光照培养;
所述腋芽的切割处位于腋芽基部以下3 mm-4mm,包含部分短缩茎组织;
所述步骤3)中的芽增殖培养基为MS培养基+0.5mg/L TDZ+0.1mg/L NAA+2mg/L AgNO3+30g/L蔗糖+0.8mg/L琼脂,pH为5.8;
所述步骤5)中固体生根基质的制备为:将蛭石、草炭及蒸馏水按1:1:0.5的体积比搅拌均匀后分装入培养瓶灭菌。
2.根据权利要求1所述的以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于:所述步骤2)中选择质量浓度为5%的NaClO消毒15min。
3.根据权利要求1所述的以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于:所述步骤3)的培养条件为:光照强度2000-2500Lux,光周期16h/d,温度25±1℃。
4.根据权利要求1所述的以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于:所述步骤5)中生根培养条件为:光照强度2000-2500Lux,光周期16h/d,温度25±1℃。
5.根据权利要求1所述的以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于:所述步骤5)中所述IBA溶液的浓度为2.0g/L,浸蘸2秒。
6.根据权利要求1所述的以大白菜腋芽为外植体的快速繁育方法,其特征在于:所述步骤6)花盆基质采用蛭石和草炭按照体积比1:1混合而成。
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