[发明专利]环氧水解酶突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用

权利要求书

1.环氧水解酶突变体，其特征在于，所述突变体相对于野生型的环氧水解酶，其空间结构中底物结合口袋附近的氨基酸发生突变；所述突变体的氨基酸序列对应于SEQ ID No.2，第263位突变为天冬酰胺、缬氨酸或谷氨酰胺；

且，还包括通过随机突变选自下组的一个或多个突变：

第176位突变为：天冬酰胺；

第151位突变为：谷胺酰胺或亮氨酸；

第105位突变为：亮氨酸；

第33位突变为：天冬酰胺或亮氨酸；

第196位突变为：丙氨酸；

第3位突变为：谷氨酸；

第4位突变为：异亮氨酸；

第20位突变为：丙氨酸；

第31位突变为：半胱氨酸；

第46位突变为：异亮氨酸；

第56位突变为：缬氨酸；

第96位突变为：甘氨酸；

第121位突变为：甘氨酸；

第136位突变为：缬氨酸；

第144位突变为：苯丙氨酸；

第181位突变为：缬氨酸；

第270位突变为：精氨酸；

第281位突变为：谷氨酸；

第296位突变为：半胱氨酸；或

第306位突变为：丙氨酸。

2.如权利要求1所述的环氧水解酶突变体，其特征在于，所述的底物结合口袋附近包括：催化三联体的邻近位置。

3.如权利要求1所述的环氧水解酶突变体，其特征在于，所述突变体包括：

(1)如SEQ ID No.2所示的多肽，第3位突变为谷氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(2)如SEQ ID No.2所示的多肽，第4位突变为异亮氨酸，第20位突变为丙氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(3)如SEQ ID No.2所示的多肽，第20位突变为丙氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(4)如SEQ ID No.2所示的多肽，第31位突变为半胱氨酸，第46位突变为异亮氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(5)如SEQ ID No.2所示的多肽，第33位突变为天冬酰胺；第263位突变为天冬酰胺，同时第176位突变为天冬酰胺，

(6)如SEQ ID No.2所示的多肽，第56位突变为缬氨酸，第96位突变为甘氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(7)如SEQ ID No.2所示的多肽，第105位突变为亮氨酸，第56位突变为缬氨酸，第121位突变为甘氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(8)如SEQ ID No.2所示的多肽，第136位突变为缬氨酸，第121位突变为甘氨酸，第105位突变为亮氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(9)如SEQ ID No.2所示的多肽，第33位突变为天冬酰胺，第105位突变为亮氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(10)如SEQ ID No.2所示的多肽，第181位突变为缬氨酸，第46位突变为异亮氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(11)如SEQ ID No.2所示的多肽，第270位突变为精氨酸，第151位突变为谷氨酰胺，第144位突变为苯丙氨酸；第263位突变为天冬酰胺，

(12)如SEQ ID No.2所示的多肽，第281位突变为谷氨酸，第151位突变为亮氨酸，第196位突变为丙氨酸；第263位突变为天冬酰胺，

(13)如SEQ ID No.2所示的多肽，第296位突变为半胱氨酸，第46位突变为异亮氨酸，第105位突变为亮氨酸，第121位突变为甘氨酸；第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，

(14)如SEQ ID No.2所示的多肽，第306位突变为丙氨酸，第46位突变为异亮氨酸，第105位突变为亮氨酸，第121位突变为甘氨酸；第263位突变为天冬酰胺，

(15)如SEQ ID No.2所示的多肽，第263位突变为天冬酰胺，第176位突变为天冬酰胺，第33位突变为亮氨酸，第151位突变为谷氨酰胺，

(16)如SEQ ID No.2所示的多肽，第263位突变为缬氨酸，第176位突变为天冬酰胺，第33位突变为亮氨酸，第151位突变为谷氨酰胺，或

(17)如SEQ ID No.2所示的多肽，第263位突变为谷氨酰胺，第176位突变为天冬酰胺，第33位突变为亮氨酸，第151位突变为谷氨酰胺。