[发明专利]一种苹果矮化砧M9T337组织培养量产方法

说明书

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种稳定的苹果矮化砧M9T337的组织培养新方法专利申请事宜。该培养方法主要利用初代培养基、第一型继代培养基、第二型继代培养基和生根培养基进行培养。本申请通过优化培养基中生长激素组合及其浓度，同时通过优化组培方法，结合继代培养中不同类型培养基的交替使用，有效降低了玻璃化苗、黄化苗现象，使增殖系数稳定在5倍，苗高在3 cm以上，增殖与生根比例控制在1：2～3之间，进一步通过将生根培养与炼苗环节结合，缩短移栽时间，使得从生根到移栽由原来的40 d左右减少到30 d左右，总体生根率稳定在88%左右，移栽成活率达到84%左右，表现出较好的组培生产效果。

技术领域

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种稳定的苹果矮化砧M9T337的组织培养新方法专利申请事宜。

背景技术

苹果是我国第一大水果品种，全国的种植面积约有3700万亩（2016年）。长期以来，我国苹果以乔砧大冠稀植为主要种植模式，存在树体高大、种植密度低、果实商品性差等问题，并且不能机械操作，已经不适应现代果业的发展。矮砧密植栽培具有树冠小、结果早、果实品质优良，便于标准化、机械化生产等优点，已经成为苹果栽培的发展趋势。近年来世界苹果生产先进国家基本上完成了由乔砧稀植向矮砧密植种植模式的过渡，我国也在普及矮砧密植栽培模式，并且在栽培中所占的比重越来越大。

利用苹果矮化砧是达到苹果矮化密植的重要手段。M9T337是苹果矮化砧M9系中的一个优良无病毒系，其矮化效果好，具有建园成形快、结果早等优点，在生产中广泛应用，种苗需求旺盛。

植物组织培养方法具有可短期内提供大量种苗，易于实现量产的技术优势，因而是多种瓜果种苗的主要提供生产方式之一。但种苗组培化量产的前提是要有稳定的增殖体系、较高的生根效率和移栽成活率，这个目标的实现需要多个因素配合，如合适的培养基、适宜的培养条件以及培养方法等。现有组培化生产研究中，由于不同物种组培条件不一，缺乏较为统一性的规律可以遵循，因此多侧重于针对不同物种、不同品种的培养基成分和培养条件的试验研究。而针对苹果组培研究中，目前主要问题还有：量产化过程中，随着继代次数增加，组培苗容易出现玻璃化、苗高降低、生长势衰退现象，进而影响增殖和生根培养，导致生产效率低，生产成本高。因而对于苹果种苗的组培体系，尚需进一步对培养基及对应的组织培养方法进行优化调整，以建立稳定的量产技术体系。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种稳定的苹果矮化砧M9T337量产组织培养新方法，从而为苹果的矮砧密植技术的推广奠定一定技术基础。

本申请所采取的技术方案详述如下。

一种苹果矮化砧M9T337组织培养用培养基组合物，所述培养基组合物包括初代培养基、第一型继代培养基、第二型继代培养基和生根培养基；具体而言：

初代培养基：以MS为基本培养基，附加有：6-苄氨基嘌呤（6-BA）0.5～1.3mg/L、吲哚丁酸（IBA）0.5～1.3mg/L、蔗糖20～40 g/L、琼脂5～7 g/L；

所述初代培养基优选配方为：以MS为基本培养基，附加有：6-苄氨基嘌呤（6-BA）1.3mg/L、吲哚丁酸（IBA）0.5mg/L、蔗糖40 g/L、琼脂6 g/L；

第一型继代培养基：以改良MS为基本培养基，附加有：蔗糖30～50 g/L、琼脂5～7 g/L，6-BA 0.1～0.5 mg/L、IBA 0.3～0.8mg/L；

所述第一型继代培养基优选配方为：以改良MS为基本培养基，附加有：蔗糖30 g/L、琼脂6 g/L， 6-BA 0.2 mg/L、IBA 0.4mg/L；

第二型继代培养基：以改良MS为基本培养基，附加有：蔗糖30～50 g/L、琼脂5～7 g/L，6-BA 0.5～1.0 mg/L、IBA 0.3～0.8mg/L；