[发明专利]一种异丙甲草胺中间体的合成方法

权利要求书

1.一种异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，由式2化合物作为起始原料，经亚胺还原酶的不对称还原作用，最终制得式1化合物，即异丙甲草胺中间体；

；

所述亚胺还原酶为SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的定向突变体；所述定向突变体为G89A、L95D、L131W、L135S、G89A+L95D、L131W+L135S、L95D+L131W+L135S、G89A+L95D+L131W、G89A+L95D+L131W+L135S；亚胺还原酶的定向突变体是所述氨基酸序列的所述位点氨基酸发生突变；

用于表述氨基酸突变的方式是常规的并如以下：

G89A表示氨基酸序列的第89位氨基酸由G突变为A；

L95D表示氨基酸序列的第95位氨基酸由L突变为D；

L131W表示氨基酸序列的第131位氨基酸由L突变为W；

L135S表示氨基酸序列的第135位氨基酸由L突变为S。

2.根据权利要求1所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，所述化合物2制备化合物1的过程中，溶剂选自水/二甲基亚砜、水/N,N-二甲基甲酰胺、水/乙酸乙酯、水/乙酸丁酯、水/二甲基乙酰胺、水/甲醇、水/乙醇、水/异丙醇、水/丙酮、水/二甲基亚砜/甲醇和水/二甲基亚砜/丙酮中的一种或者几种。

3.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，选用甲酸钠和甲酸调节溶剂的pH值至6.5~7.0。

4.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，选用甲酸脱氢酶和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，作为电子传递载体。

5.根据权利要求4所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，甲酸脱氢酶和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在混合液中的浓度均为0.1~1 mmol/L。

6.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，加入亚胺还原酶，搅拌至全部溶解后，加入化合物2，开始反应。

7.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，所述化合物2在混合液中的质量浓度为1~300g/L。

8.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，所述原料化合物2和亚胺还原酶的质量比为1:1～90:1。

9.根据权利要求1或2所述的异丙甲草胺中间体的合成方法，其特征在于，所述化合物2制备化合物1的过程中，反应温度为22~35℃，反应pH为6.5~7.0；反应时间为10~20小时。