[发明专利]前列腺癌干细胞标志物、抗体OV6在制备前列腺癌干细胞标记材料中的应用及标记方法在审
| 申请号： | 201810389694.0 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108727495A | 公开（公告）日： | 2018-11-02 |
| 发明（设计）人： | 孙颖浩;王超;鲁欣;高旭;黄海;孔德沛;李惠珍;瞿旻 | 申请（专利权）人： | 上海长海医院 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N5/095;G01N33/569 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 孙营营 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 前列腺癌 干细胞标志物 前列腺癌细胞 干细胞标记 抗体标记 小鼠源性 抗体 制备 前列腺癌细胞系 特异性和敏感性 前列腺癌组织 流式细胞术 标记效果 标记效率 磁性微珠 显著标记 相关基因 阳性细胞 药物刺激 医药技术 小鼠IgG 成瘤率 成球率 干细胞 高表达 大鼠 孵育 干性 应用 细胞 检测 研究 | ||
1.一种前列腺癌干细胞标志物，其特征在于，标志物为抗体OV6。
2.抗体OV6在制备前列腺癌干细胞标记材料中的应用。
3.一种利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，包括以下步骤：
a.用小鼠源性OV6抗体标记前列腺癌细胞系或前列腺癌组织细胞30分钟；
b.将磁性标记的前列腺癌细胞系或前列腺癌组织细胞，与大鼠抗小鼠IgG、磁性微珠一起孵育；
c.将孵育后的体系置于MACS MS柱上进行过滤分离，得到OV6阳性前列腺癌细胞，即为前列腺癌干细胞。
4.根据权利要求3所述的利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，所述前列腺癌细胞系为C4-2和C4-2B。
5.根据权利要求4所述的利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，所述前列腺癌细胞系C4-2、C4-2B细胞在RPMI 1640培养液含10％胎牛血清中培养，辅以1％青霉素/链霉素。
6.根据权利要求3所述的利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，步骤a中的前列腺癌细胞系在用小鼠源性OV6抗体标记前，先采用恩杂鲁胺进行药物刺激。
7.根据权利要求6所述的利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，分别将5×106个前列腺癌细胞系铺板于10cm皿中，24小时后加入恩杂鲁胺，刺激48小时。
8.根据权利要求3所述的利用OV6作为标志物对前列腺癌干细胞进行标记的方法，其特征在于，步骤c后还包括采用流式细胞术检测OV6阳性前列腺癌细胞标记效率的步骤，步骤如下：
d.利用APC偶联的OV6抗体标记OV6阳性前列腺癌细胞；
e.利用Cyan ADP分选仪进行流式细胞术测定APC-OV6细胞的比例分布，得到OV6阳性前列腺癌细胞标记效率。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海长海医院，未经上海长海医院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810389694.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
