[发明专利]一种噬菌体ФX174裂解蛋白E及其应用在审
| 申请号： | 201810392228.8 | 申请日： | 2018-04-27 |
| 公开（公告）号： | CN108624545A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 诸葛斌;黄孟楠;陆信曜;宗红 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N9/90;C12N15/33;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组大肠杆菌 噬菌体 蛋白E 裂解 细胞 亚油酸异构酶 孔洞 遗传工程领域 出发菌株 释放条件 细胞表面 释放 渗透压 再利用 应用 引入 优化 | ||
1.一种生产亚油酸异构酶的重组大肠杆菌，其特征在于，共表达噬菌体ФX174裂解蛋白E，所述噬菌体ФX174裂解蛋白E含有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌以E.coliBL21(DE3)、E.coli JM109(DE3)、E.coli OrigamiB(DE3)、E.coli Rosetta(DE3)、中的任意一种作为宿主。
3.根据权利要求5所述的重组大肠杆菌，其特征在于，以E.coli BL21(DE3)为宿主，以T7启动子调控亚油酸异构酶的表达，以启动子ParaB控制伴侣蛋白GroEL-GroES的表达；以启动子pR/pL控制噬菌体ФX174裂解蛋白E的表达。
4.一种提高微生物蛋白释放率的方法，其特征在于，在所述微生物细胞中表达噬菌体ФX174裂解蛋白E，所述噬菌体ФX174裂解蛋白E含有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述微生物包括革兰氏阴性细菌。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述蛋白包括但不限于酶。
7.一种生产亚油酸异构酶的方法，其特征在于，应用权利要求1～3任一所述的重组大肠杆菌进行发酵。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在发酵过程中添加ETDA、1～2g/L脱氧胆酸钠、吐温-20、曲拉通X-100。
9.SEQ ID NO.1所示的噬菌体ФX174裂解蛋白E在食品、生物领域的应用。
10.权利要求5～7任一所述的重组大肠杆菌在制备含蛋白的产品方面的应用。
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