[发明专利]一种快速检测油脂或生物样品中的维生素D的方法

权利要求书

1.一种快速检测油脂或生物样品中的维生素D的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

S1：待测样品的制备；

S2：将待测样品使用多维色谱系统进行维生素D的分离；

其中，所述多维色谱系统包括依次连接的超临界色谱部分及反相液相色谱部分，所述反相液相色谱部分中包括一个或一个以上的反相液相色谱柱；

所述超临界色谱部分包括超临界流动相以及改性剂，所述改性剂选自醇类物质、腈类物质或它们的水溶液，优选为甲醇或其水溶液；

S3：检测由S2步骤分离得到的维生素D。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述超临界色谱部分包括一个超临界色谱柱；所述反相液相色谱部分中包括两个反相液相色谱柱。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述多维色谱系统中的色谱柱通过多通阀组进行连接。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述超临界色谱部分中：

固定相选自极性基团改性的硅胶，所述极性基团选自羟基、氨基或氰基，优选地，所述改性的硅胶选自二醇基硅胶；

流动相为超临界二氧化碳。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述反相液相色谱部分中：

固定相选自疏水基团改性的硅胶，所述疏水基团选自烃基，优选地，所述改性的硅胶优选自C18-硅胶；

所述流动相为极性有机溶剂或其水溶液。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述反相液相色谱部分的反相液相色谱柱相同或不同。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其特征在于，在S2步骤中，被超临界色谱部分吸附的弱极性物质仅在所述改性剂的作用下被输送到反相液相色谱部分中，并在该反相液相色谱部分中去除从超临界色谱部分中流出的超临界流动相。

8.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，S2步骤中，包括如下步骤：

S21：使用超临界色谱柱对待测样品进行成分分离，并将弱极性物质输送到反相液相色谱柱中；

S22：在反相液相色谱柱中，将从超临界色谱柱中流出的超临界流动相去除；

S23：在上述反向液相色谱柱中，进一步通入流动相，将存在于反相液相色谱柱中的物质进行分离，得到分离出的维生素D组分；

任选地，S21步骤中所述将弱极性物质输送到反相液相色谱柱中与S22步骤同步进行。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其特征在于，S2步骤中，包括如下步骤：

S21’：使用超临界色谱柱对样品进行成分分离，将弱极性物质输送到反相液相色谱部分的第一反相液相色谱柱中；

S22’：在第一反相液相色谱柱中，将从超临界色谱柱中流出的超临界流动相去除；

S23’：在第一反相液相色谱柱中，进一步通入流动相将存在于该色谱柱中的弱极性物质输送到第二反相液相色谱柱中，在所述第二反相液相色谱柱中分离得到维生素D组分；

任选地，S21’步骤中所述将弱极性物质输送到第一反相液相色谱柱中与S22’步骤同步进行。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，在S2步骤前，还包括使用前处理色谱柱分离待测样品中的蛋白成分的步骤；S3步骤中，使用质谱仪器进行检测。