[发明专利]一种抗衰老细胞制剂及其制备方法

权利要求书

1.一种抗衰老细胞制剂，在复方电解质溶液中混悬胎肝间充质干细胞制备得到，所述每1000ml复方电解质溶液中含氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。

2.根据权利要求1所述的抗衰老细胞制剂，其特征是所述抗衰老细胞制剂中含有胎肝间充质干细胞3～5×10⁶/ml。

3.根据权利要求1所述的抗衰老细胞制剂，其特征是所述的胎肝间充质干细胞是从造血期的胚胎肝脏组织中获取胚胎肝脏细胞悬液，以含体积分数10%胎牛血清的DMEM低糖培养基作为胎肝间充质干细胞完全培养基对所述细胞悬液进行培养，经过多次传代后得到。

4.根据权利要求1、2或3所述的抗衰老细胞制剂，其特征是使用传代至第三代的胎肝间充质干细胞制备所述抗衰老细胞制剂。

5.根据权利要求4所述的抗衰老细胞制剂，其特征是将所述培养得到的胎肝间充质干细胞加入到细胞冻存液中，液氮冷冻保存。

6.根据权利要求5所述的抗衰老细胞制剂，其特征是所述细胞冻存液由胎肝间充质干细胞完全培养基、胎牛血清和二甲基亚砜按照7∶2∶1的体积比混合得到。

7.根据权利要求1所述的抗衰老细胞制剂，其特征是所述胎肝间充质干细胞按照下述方法培养得到：

1)、配制含体积分数10%胎牛血清的DMEM低糖培养基作为胎肝间充质干细胞完全培养基；

2)、选择造血期胚胎肝脏组织，以PBS清洗后，剪成1mm×1mm×1mm的组织块；

3)、过滤出组织块，加入5倍体积的胎肝间充质干细胞完全培养基，充分吹打，获得胚胎肝脏细胞悬液；

4)、离心胚胎肝脏细胞悬液，弃上清，得到细胞沉淀；

5)、以胎肝间充质干细胞完全培养基重悬细胞沉淀，过滤，以1×10⁶/ml接种于培养瓶中，在饱和湿度、37℃、5% CO₂培养箱中培养；

6)、原代培养48～72h后换液，之后每3d换液一次，待细胞长至80～90%融合，用0.25%含EDTA胰酶消化传代；

7)、将第三代胎肝间充质干细胞加入到细胞冻存液中，液氮冷冻保存。

8.根据权利要求7所述的抗衰老细胞制剂，其特征是将所述胚胎肝脏细胞悬液以1000rpm/min离心5min。

9.根据权利要求7所述的抗衰老细胞制剂，其特征是所述用于消化细胞的胰酶中含有0.02% EDTA。