[发明专利]一种抗衰老细胞制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种抗衰老细胞制剂，是在复方电解质溶液中混悬胎肝间充质干细胞制备得到，抗衰老细胞制剂中含有胎肝间充质干细胞3～5×10⁶/ml，每1000ml复方电解质溶液中含氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。本发明细胞制剂能够改善大鼠机体功能，通过清除体内氧自由基，增强血清SOD活性，降低MDA水平，从而发挥抗衰老功能，延缓衰老，减少衰老相关疾病发生。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种细胞制剂，特别是涉及一种具有抗衰老功效的细胞制剂及其制备方法。

背景技术

衰老是机体各组织、器官功能随年龄增长而发生退行性变化的过程，该过程会降低机体面对环境胁迫维持动态平衡的能力，从而增加机体患病和死亡的可能性。随着人口老龄化的进展，高龄老人增长速度远远超过老年人口增长速度。高龄老年人口的大量出现，意味着各种与衰老相关的疾病，如心脑血管疾病、糖尿病、老年痴呆等发病率逐渐增高。部分发病人群生活不能自理，占有更多医疗资源，需要各方面的关怀。延缓衰老可能减少相关疾病的发生、提高机体功能，从而提高老龄人群生活质量。

抗衰老即改善机体细胞代谢，促进细胞修复和组织再生。细胞更新组织再生是生物体发生发展的关键。干细胞是人体内具有自我更新、多向分化潜能的原始细胞。

干细胞可以分泌一些细胞因子，如胰岛素生长因子(IGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、超氧化物歧化酶等，提升衰老机体各组织功能。同时，由于干细胞的免疫调节功能和较低的免疫原性，使得干细胞成为组织工程和再生医学的优势种子细胞。目前很多学者都在关注干细胞的抗衰老功能，如骨髓间充质干细胞等。

胚胎肝脏造血期的胚胎肝脏间充质干细胞(简称胎肝间充质干细胞)具有与骨髓间充质干细胞相似的特性，但其拥有更长的端粒酶长度，其增殖分化能力也优于骨髓间充质干细胞。有学者将胎肝间充质干细胞诱导分化为骨细胞后，粘附于支架材料上，用于骨组织的修复；也可以在体外环境下诱导胎肝间充质干细胞向类心肌细胞、胰岛B样细胞等方向分化，用于心机梗死及糖尿病的治疗。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗衰老细胞制剂，以能够改善心功能，发挥一定的抗衰老作用。

本发明所述的抗衰老细胞制剂是在复方电解质溶液中混悬胎肝间充质干细胞制备得到，其中，所述每1000ml复方电解质溶液中含氯化钠5.26g、葡萄糖酸钠5.02g、醋酸钠3.68g、氯化钾0.37g、氯化镁0.30g。

进一步地，本发明所述抗衰老细胞制剂中含有胎肝间充质干细胞3～5×10⁶/ml。

其中，所述的胎肝间充质干细胞是从造血期的胚胎肝脏组织中获取胚胎肝脏细胞悬液，以含体积分数10%胎牛血清的DMEM低糖培养基作为胎肝间充质干细胞完全培养基对所述细胞悬液进行培养，经过多次传代后得到。

优选地，本发明是使用传代至第三代的胎肝间充质干细胞制备所述抗衰老细胞制剂。

本发明中，是将所述培养得到的胎肝间充质干细胞加入到细胞冻存液中，液氮冷冻保存。所述细胞冻存液由胎肝间充质干细胞完全培养基、胎牛血清和二甲基亚砜按照7∶2∶1的体积比混合得到。

本发明更具体的胎肝间充质干细胞培养方法包括：

1)、配制含体积分数10%胎牛血清的DMEM低糖培养基作为胎肝间充质干细胞完全培养基；

2)、选择造血期胚胎肝脏组织，以PBS清洗后，剪成1mm×1mm×1mm的组织块；

3)、过滤出组织块，加入5倍体积的胎肝间充质干细胞完全培养基，充分吹打，获得胚胎肝脏细胞悬液；

4)、离心胚胎肝脏细胞悬液，弃上清，得到细胞沉淀；