[发明专利]一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法在审
| 申请号： | 201810396107.0 | 申请日： | 2018-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN108741087A | 公开（公告）日： | 2018-11-06 |
| 发明（设计）人： | 刘汉石;吴俊罡;刘雅萍 | 申请（专利权）人： | 大连普瑞康生物技术有限公司 |
| 主分类号： | A23L33/135 | 分类号： | A23L33/135;A01H4/00 |
| 代理公司： | 大连博晟专利代理事务所(特殊普通合伙) 21236 | 代理人： | 于忠晶 |
| 地址： | 116001 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 酵素 植物细胞 器官 果粒 益生菌发酵 植物细胞系 益生菌 发酵 制作 高新技术生产 寡肽化合物 微生物降解 肠道菌群 器官替代 生物活性 原料蛋白 制作工艺 质量稳定 可调节 寡聚 可控 制备 接种 均衡 安全 全程 水果 吸收 卫生 保证 | ||
1.一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)培养酵素发酵所需的益生菌发酵液
功效明确的益生菌通过规范的无菌操作接入无菌的MRS培养基中，35-40℃培养箱中静止培养36-48h，备用，检测所制益生菌发酵液符合要求；
(2)培养待发酵的植物细胞果粒或器官
植物细胞果粒或器官的诱导
取待诱导植物外植体，用75％酒精浸泡10-30s，然后用0.1-0.4％氯化汞溶液消毒8-12min，再用无菌水反复冲洗4-5次后放在无菌滤纸上吸干外植体表面水分，用无菌镊子去除种子表面表皮，接种在添加了0.5-3mg/L赤霉素、10-30g/L蔗糖、0.6g/L琼脂的MS固体培养基上，22-27℃暗培养，30天后生长成为植物细胞果粒或器官；
通过植物细胞或器官发酵技术，培养所需的植物果粒或器官备用，将诱导完全的植物细胞系或器官以10％接种比例接种到MS培养基中，培养温度23℃～26℃，每天光照0～12h，培养23天后，无菌收集获得安全的植物细胞果粒或器官，备用；
(3)将益生菌液按照比例接种到植物细胞果粒或器官中培养
将益生菌培养液按照1％的比例接种到植物细胞果粒或器官中，在23℃～26℃条件下培养60天；
(4)培养结束后冰冻灭活益生菌
将步骤(3)培养好的产品放在-10℃～-2℃条件下放置24小时灭活益生菌活菌，后放在25℃条件下化冻，得酵素产品。
2.根据权利要求1所述的一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法，其特征在于，步骤(1)中所述益生菌为复合菌种，所述复合菌种为酵母菌种、乳酸菌种混合成；所述乳酸菌种包括保加利亚乳酸杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌中的一种或多种；所述酵母菌种包括假丝酵母、酿酒酵母、异常汉逊酵母中的一种或多种；各种有益菌的活菌数量总数不低于2亿/ml；所述酵母类菌种占所述发酵原料质量的1％～3％；所述乳酸菌类菌种占所述发酵原料质量的1％～3％。
3.根据权利要求1所述的一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法，其特征在于，步骤(1)中所述检测所制益生菌发酵液符合要求为：根据国标GB 4789.35-2016检验乳酸菌不低于1亿/ml，根据国标GB 4789.15-2016检测酵母菌不低于1亿/ml，根据国标GB 4789.2-2010检测其他细菌总数不超过100个/ml。
4.根据权利要求1所述的一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法，其特征在于，所述MRS培养基的组成成分如下：
用高压锅在121℃灭菌15min，调节pH6.2～6.4。
5.根据权利要求1所述的一种通过益生菌发酵植物细胞果粒或器官制作酵素的方法，其特征在于，所述MS培养基的组成成分如下：
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