[发明专利]一种大鲵皮胶原蛋白提取方法和由该方法提取得到的胶原蛋白产品

说明书

本发明涉及一种大鲵皮胶原蛋白提取方法和由该方法提取得到的胶原蛋白产品。所述方法包括：获取大鲵皮、去除脂肪、去除色素、柠檬酸提取、一次析出、二次析出、透析并冷冻干燥等步骤。采用本发明的酸法提取方法得到的胶原蛋白的量与酶法提取得到的胶原蛋白的量相当或者更多，并且工艺更加简单。由本发明方法提取得到的胶原蛋白产品包含全面的氨基酸，营养价值更高。

技术领域

本发明涉及动物胶原蛋白提取 技术领域，尤其涉及一种大鲵皮胶原蛋白提取方法和由该方法提取得到的胶原蛋白产品。

背景技术

大鲵(Giant)，又被叫做娃娃鱼，属两栖纲有尾目，隐鳃鲵科大鲵属，是世界上最大的两栖动物，是一种处于水生到陆生之间的过渡物种大鲵几乎是和恐龙同一个时代的物种，进化十分原始，被称为“活化石”。

大鲵在我国分布地域也比较广泛，主要栖息于长江、黄河及珠江中上游的各支流中，是我国特有的珍稀野生动物，野生的大鲵被列为国家二级保护动物，不得捕杀，但人工饲养的子二代大鲵可作为一种食用性水产。我国已经开始人工繁殖和驯养大鲵，如今大大鲵数量已经有了大量的增加，并且人工养殖的子二代大鲵是允许食用的。由于各项保护措施和技术的改进，大鲵资源如今处在快速的增长阶段，这给大鲵资源今后的发展利用提供了强有力的保障。

胶原蛋白（collagen）是一种具有三条肽链结构的细胞外蛋白，在生物体内分布广泛，在动物体内所有的蛋白质当中胶原蛋白的含量最高，达到了粗蛋白含量的 80%以上，是动物体生命活动的重要参与者。在生物体内，胶原蛋白不仅在含量上有很大的比重，种类也各有不同，目前发现的就有 28 种之多。胶原蛋白的应用非常广泛，在医学上，可作为生物医学材料。胶原蛋白对皮肤有着及其强的附着性和平滑性，在医学上被用作伤口愈合的缝合线，而且胶原蛋白具有良好的平滑性，使得其在医疗缝合的结头不易松散，这样可以是的伤口在短时间内愈合。医学界还在积极地研究胶原蛋白药物，这些药物大多是在青光眼治疗和眼科中抗感染等方面，也有多用在创伤中的局部治疗及控制伤口的感染，以及妇科的宫颈发育异常和外科的局部麻醉等。在组织工程上，胶原蛋白和细胞外的其他物质构成了成组织细胞外基质，因此是生物体内的一种天然外支架材料。在食品上，胶原蛋白可以用于肉类的烹饪以提高肉质硬度；可以作为天然的肠衣制品；而且胶原蛋白具有固定化酶的功能，具有抗氧化性，这对肉制品的风味和质量都有极大的改善作用。另外，胶原蛋白在化妆品、营养添加剂等领域也有大量应用。

胶原蛋白提取的基本原理是根据胶原蛋白的特性改变蛋白质所在的外界环境，从而把胶原蛋白从其他蛋白质中分离出来。提取方法依据提取介质的不同主要可以分为 4种：即热水提取、酸法提取、碱法提取和酶法提取。此外，还有酸、碱结合热水提取，酸酶结合提取等。

在从大鲵来源的材料中提取胶原蛋白时，一般认为热水法由于提取温度较高，得到的胶原蛋白大多变性为明胶；碱法迅速且彻底，但含羟基和巯基的氨基酸全部被破坏且产生消旋作用（结构变异）；酸法得率太低，且提取时间较长，而且色氨酸对酸不稳定。因此，一般多用酶法或者包括酶解步骤的提取方法提取以获得高得率。

例如，CN201710501842.9 公开了一种从大鲵中提取胶原蛋白的方法，该方法包括以下步骤：(1)杀菌处理、搅拌制浆、酸浸、水洗、碱浸、二次水洗、盐浸、酶解、纯化等步骤。该专利申请披露，即使采用酸法再结合碱浸、盐浸、酶解中的一种，提取率为40%左右。

又例如，CN201410630235.9 公开了一种利用大鲵的蜕皮提取胶原蛋白的方法，该方法包括如下步骤：预处理、酶解粗提、过滤、浓缩、喷雾干燥等步骤，最后得到胶原蛋白，其分子量在 3000 道尔顿以下。

然而，采用酶法提取同样存在不足。例如，水解不够彻底，由于蛋白酶切除了胶原蛋白的非螺旋端肽，可能会引起胶原蛋白结构部分发生变化。另外，对提取条件例如 pH 要求比较苛刻，并且使用比较昂贵的酶，对于大规模提取而言，提取方法的成本比较昂贵。