[发明专利]一种适用于卤虫无节幼体的噬菌体强化方法

说明书

本发明公开了一种适用于卤虫无节幼体的噬菌体强化方法，包括以下步骤噬菌体裂解液的制备，吸附时间以及噬菌体滴度对噬菌体强化的影响，强化后的卤虫无节幼体能够减少水产致病菌在水产品肠道中的定植，并且这些噬菌体也能够在鱼类肠道中保持稳定，从而避免或减少抗菌素在水产养殖中的使用，促进水产养殖业的健康发展。

技术领域

本发明属于生物技术领域，设计一种适用于卤虫无节幼体的噬菌体强化方法。

背景技术

我国是水产养殖大国，养殖产量约占全世界总产量的2/3。细菌性疾病是水产养殖业面临的重大问题，养殖的水产品时刻面临着微生物感染的威胁。在水产养殖业，每年因病害损失的水产品占总产量的30％，直接经济损失超过百亿元，其中细菌性鱼类疾病的发病率和致死率都接近50％。

重要的水产病原菌包括弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属、黄杆菌属、不动杆菌属、假单胞菌属、爱德华菌属、耶尔森氏菌属、沙门氏菌属、葡萄球菌属、链球菌属等。

虽然抗菌素在治疗和预防细菌性感染上具有快速且有效的特性，但是抗菌素在水产养殖业的过度使用已经造成了多重耐药性细菌的出现。抗菌素的长期滥用，造成了约90％的细菌对1种以上抗菌素具有耐药性，20％的细菌对5种以上抗菌素具有耐药性，对食品安全造成了威胁。为了缓解抗菌素滥用带来的危害，亟需研发对环境和人类健康无害的抗菌素替代产品。

噬菌体是能够通过细菌裂解来调节细菌种群的天然抗菌剂。噬菌体对多重耐药的革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有杀菌活性。由于噬菌体的杀菌机制与抗生素的完全不同，所以噬菌体可以杀死多重耐药的细菌。由于其特异性的限制，噬菌体疗法的抗菌谱较窄，仅能抑制单一物种，甚至在某些情况下，某种噬菌体仅能抑制种内的某些菌株。但是，由于抗菌素的广谱性，抗生素改变了患者整个微生物种群，而不是目标病原体。

虽然噬菌体容易与普通颗粒饲料混合，但普通饲料对仔苗的诱食性很差，所以噬菌体很难进入到仔鱼消化道起到保护作用。本发明设计的方法，采用特定的卤虫无节幼体强化方法，使开口饲料的卤虫无节幼体作为噬菌体的载体，携带噬菌体进入仔鱼消化道，消除水产致病菌的威胁，从而起到保护作用。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种快速高效的卤虫无节幼体的噬菌体强化方法，采用本方法可以快速高效地使开口饲料的卤虫无节幼体作为噬菌体的载体，携带噬菌体进入鱼类消化道，

本发明的目的是通过以下技术方案实现的

一株能够裂解维氏气单胞菌的噬菌体，其特征在于：噬菌体名称为ΦA8-29，分类名称为Aeromonas veronii phage，保藏编号：CGMCC No.9152；保藏单位：中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2014年04月25日。

噬菌体ΦA8-29裂解的维氏气单胞菌，名称为A8-29，分类名称为Aeromonasveronii，保藏编号：CGMCC No.9093，保藏单位：中国普通微生物菌种保藏管理中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2014年04月25日。

一株能够裂解潘氏变形杆菌的噬菌体，其特征在于：噬菌体名称为ΦP4-3，分类名称为：Proteus pennea phage。

噬菌体ΦP4-3裂解的宿主菌，名称为：P4-3，分类名称为Proteus pennea。

一株能够裂解类志贺邻单胞菌的噬菌体，其特征在于：噬菌体名称为ΦP4-7，分类名称为：Plesiomonas shigelloides phage。

噬菌体ΦP4-7裂解的宿主菌，名称为：P4-7，分类名称为Plesiomonasshigelloides。

一种适用于卤虫无节幼体的噬菌体强化方法，步骤如下：