[发明专利]酪酸梭菌的富集培养基、富集方法、冷冻干燥保护剂及其冻干粉的制备方法有效
申请号: | 201810400462.0 | 申请日: | 2018-04-28 |
公开(公告)号: | CN108504610B | 公开(公告)日: | 2021-09-03 |
发明(设计)人: | 方佩佩;贾俊涛;孙宇;唐静;赵丽青;林超;姜英辉;张晓良;黄小华 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/04;C12R1/145 |
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地址: | 266002 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酪酸 富集培养基 富集 方法 冷冻 干燥 保护 及其 干粉 制备 | ||
1.一种酪酸梭菌的真空冷冻干燥保护剂,其特征在于,由下列成分构成:
谷氨酸钠、丙酮酸钠、低聚果糖、低聚半乳糖、三聚磷酸钠、脱脂乳粉、蛋白胨、甘油和无菌水;
各成分终浓度为:谷氨酸钠5~12%,丙酮酸钠2~8%,低聚果糖3~10%,三聚磷酸钠1%,低聚半乳糖3~10%,脱脂乳粉1~10%,蛋白胨3%,甘油0.3~2%,其余为无菌水。
2.酪酸梭菌冻干粉的制备方法,其特征在于,包括下列步骤:将增殖后的酪酸梭菌菌悬液离心弃上清,权利要求1所述的真空冷冻干燥保护剂用无菌水溶解,将酪酸梭菌添加到真空冷冻干燥保护剂溶液中摇床均匀混合,菌悬液1mL分装至西林瓶中,经超低温冷激后真空冷冻干燥;酪酸梭菌与真空冷冻干燥保护剂溶液按照体积比=1:1均匀混合,20℃摇床1h,转速80rpm;超低温冷激条件为:-196℃液氮处理10min;真空冷冻干燥条件为:真空度0.54mbar,-80℃真空冷冻4~6h;真空度0.54mbar,-50℃真空冷冻14~16h;真空度0.30mbar,-20℃真空冷冻10~15h;真空度0.30mbar,0℃真空冷冻10~15h;真空度0.30mbar,10℃真空冷冻5~8h。
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