[发明专利]抗破伤风毒素中和抗体、其制备方法及用途

权利要求书

1.一种抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段的轻链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区的互补决定区CDR2的氨基酸序列如SEQID NO.2所示，轻链可变区的互 补决定区CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；

所述抗原结合片段的重链可变区的互补决定区CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，重链可变区的互补决定区CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，重链可变区的互补决定区CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

2.根据权利要求1所述的抗原结合片段，其特征在于，所述抗原结合片段的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

所述抗原结合片段的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示。

3.一种全人源抗破伤风毒素中和抗体，其特征在于，所述中和抗体包括如权利要求1或2所述的抗原结合片段；

所述抗体的恒定区包括人源IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定区中的任意一种或至少两种的组合。

4.根据权利要求3所述的中和抗体，其特征在于，所述抗体的恒定区为人源IgG1恒定区。

5.一种DNA片段，其特征在于，所述DNA片段包括编码如权利要求1或2所述的抗原结合片段或如权利要求3所述抗体的核苷酸序列。

6.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包括如权利要求5所述的DNA片段。

7.根据权利要求6所述的表达载体，其特征在于，所述表达载体为pcDNA3.3载体。

8.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有如权利要求5所述的DNA片段和/或如权利要求6或7所述的表达载体。

9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为CHO细胞或293细胞。

10.一种制备如权利要求1或2所述抗原结合片段和/或如权利要求3所述抗体的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)采集免疫个体的B细胞，PCR获得抗体可变区的DNA片段；

(2)将步骤(1)所述DNA片段连接入表达载体，转入感受态细胞，培养后挑取单克隆细胞进行筛选；

(3)将筛选后的表达载体转入宿主细胞，培养并收集上清液，分离纯化得到所述抗原结合片段和/或抗体。

11.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括如权利要求1或2所述抗原结合片段、如权利要求3或4所述抗体、如权利要求5所述的DNA片段、如权利要求6或7所述的表达载体或如权利要求8或9所述的宿主细胞中的任意一种或至少两种的组合。

12.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂中的任意一种或至少两种的组合。

13.一种试剂盒，其特征在于，所述 试剂盒包括如权利要求1或2所述抗原结合片段、如权利要求3或4所述抗体、如权利要求5所述的DNA片段、如权利要求6或7所述的表达载体或如权利要求8或9所述的宿主细胞中的任意一种或至少两种的组合。

14.根据权利要求13所述的试剂盒，其特征在于，所述 试剂盒还包括洗涤液。

15.一种如权利要求1或2所述抗原结合片段、如权利要求3或4所述抗体、如权利要求5所述的DNA片段、如权利要求6或7所述的表达载体或如权利要求8或9所述的宿主细胞在制备破伤风药物和/或检测试剂中的应用。