[发明专利]一种结合远缘杂交和组织培养高效创制杜鹃新种质的方法

权利要求书

1.一种结合远缘杂交和组织培养高效创制杜鹃新种质的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

(1)亲本材料的选择：父本为东鹃系列品种‘胭脂蜜’，母本为春鹃系列品种‘春五宝’，以它们为亲本材料进行杂交；

(2)花期杂交授粉：选择处于气球状时期的大花蕾，开花前对母本进行去雄套袋，并收集父本的新鲜花粉，于晴天上午9:00～12:00进行常规人工授粉，授粉后给母本套上硫酸纸袋，封好套袋口，标记父母本名称和授粉日期；

(3)杂交种子的无菌萌发与生根培养：于杂交当年11月中旬～12月底收集杜鹃杂交所得蒴果，将其在无菌环境下剥开，取得纯净无杂质的种子，将种子经过消毒处理后，置于3-5℃环境中预处理18-22天，然后进行萌发培养，培养条件是温度 24～26℃、相对湿度65～75％、光周期16/8h，成苗后将小苗转移到生根培养基中，继续培养成8～10cm高的的杜鹃无菌组培苗；

(4)组培苗的快速繁殖：将杜鹃无菌组培苗切取带芽茎段，将其接种至生根培养基中，进行继代生根培养，得到杂种苗；

(5)杂种苗的炼苗与移栽：待杂种苗生长至根系较壮后，揭开瓶盖进行炼苗，将炼苗后的幼苗移栽至盛有泥炭土的营养钵中，盖上薄膜遮荫，直至植株成活后，揭去薄膜，在温室中按常规杜鹃苗进行管理；

步骤(3)所述的消毒处理的方式是1.5 % NaClO溶液处理9-11 min，75% 乙醇浸泡25-35s，随后用无菌水洗涤2-3次；

步骤(3)萌发培养所采用的萌发培养基为1/2 WPM 培养基 +GA₃ 80～120 mg/L，pH=5.6；

步骤(3)和步骤(4)所述的生根培养基为1/2 WPM +IBA 0.1～0.5 mg/L +NAA 0.4～0.6 mg/L+活性炭0.04～0.06%，pH=5.6；

步骤(3)和步骤(4)所述的生根培养条件为：24～26℃、暗光培养28～32天后置于3000～4500lux下，16/8h光周期培养55～65天。