[发明专利]一种负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201810409507.0 | 申请日： | 2018-05-02 |
| 公开（公告）号： | CN108619114B | 公开（公告）日： | 2020-08-11 |
| 发明（设计）人： | 刘必成;汤涛涛;吕林莉 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | A61K47/06 | 分类号： | A61K47/06;A61K47/46;A61K31/573;A61P13/12;A61P29/00;A61P37/06 |
| 代理公司： | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 孙斌 |
| 地址： | 211102 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 负载 地塞米松 巨噬细胞 源微囊泡 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡，其特征在于，由来源于鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞的微囊泡包载地塞米松形成；
所述的负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡的制备方法，包括以下步骤：
（1）培养鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞；
（2）用地塞米松处理RAW 264.7细胞；
（3）收集步骤（2）中地塞米松处理细胞后的培养基上清，用差速离心的方法收集微囊泡即得到负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡。
2.一种权利要求1所述的负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）培养鼠巨噬细胞系RAW 264.7细胞；
（2）用地塞米松处理RAW 264.7细胞；
（3）收集步骤（2）中地塞米松处理细胞后的培养基上清，用差速离心的方法收集微囊泡即得到负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述培养鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞具体过程为：将RAW 264.7细胞培养于含胎牛血清的RIPM 1640培养基中培养。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述培养RAW 264.7细胞所用的胎牛血清为去除微囊泡的胎牛血清。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述用地塞米松处理RAW264.7细胞具体过程为：当步骤（1）中培养RAW 264.7细胞融合达到70%-80%时，用不含胎牛血清的RIPM 1640培养基清洗细胞，并更换为无胎牛血清的RIPM 1640培养基，加入地塞米松，进行处理。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）具体过程为：收集步骤（2）中地塞米松处理细胞后的培养基上清，先低速离心取上清液，再高速离心弃去上清，加PBS重悬清洗，再高速离心得到的沉淀即为负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡。
7.一种权利要求1所述的负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡在制备治疗肾脏病的药物或者制剂中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡能够更好的被损伤细胞摄取，抑制促炎信号通路的活化和炎症细胞的浸润。
9.一种权利要求1所述的负载地塞米松的巨噬细胞源微囊泡制备抗炎或免疫抑制药物或者制剂中的应用。
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