[发明专利]一种测定肠粘膜损伤的联合检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种测定肠粘膜损伤的联合检测试剂盒及其制备方法，检测垫上设有检测线T1、检测线T2和质控线，检测线T1上包被有钙卫蛋白单克隆抗体，检测线T2上包被有血红蛋白单克隆抗体，质控线上包被有羊抗鼠或羊抗兔IgG，标记垫上包被有量子点标记的钙卫蛋白单克隆抗体与量子点标记的血红蛋白单克隆抗体的混合物，所述量子点为两种不同颗粒粒径的混合物。本发明的试剂盒可以同步检测粪便中的钙卫蛋白和便潜血，可以快速简便的判断肠粘膜损伤程度，检测灵敏度高，特异性好。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种测定肠粘膜损伤的联合检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

钙卫蛋白(calprotectin)属于S-100家族，是一个相对分子质量为36kDa的钙-锌结合蛋白，由两条MRP-8链和一条MRP-14链构成的异源三聚体，主要来源于中性粒细胞，是中性粒细胞更新的重要标志物。

粪便中钙卫蛋白的出现是肠胃增生性疾病和肠道炎症感染性疾病的标志。一般情况下，单从疾病症状上很难区分急性肠道激惹所引起的不适病症与慢性感染性胃肠道疾病，从而导致了无必要及过度的肠镜滥用，钙卫蛋白是急性胃肠道感染的一种标志，并且由此可以判断感染的程度。

便隐血(FOBT)：也称为便潜血，是指消化道出血量很少时，红细胞也被破坏，血红蛋白分子释放到粪便中，粪便外观无异常改变，肉眼和显微镜均不能证实的出血，只能化学方法或免疫学方法检测到。

由于肠道的出血是间断性的，不是持续性出血，出血速度可能低于或超出潜血试验的检测阈值等原因，便潜血试验的敏感性还是不尽人意。同粪便潜血相比较，粪便钙卫蛋白能发现早期不出血病灶，而且结果不受全身情况、饮食成分、一般药物及营养支持治疗的影响。

目前评价肠炎的金标准是结肠镜活检。这项技术可以让我们对肠道进行目测检查，并且能够获得粘膜活检标本用于组织学检查。疾病的位置、范围和严重性都可以用这种方法确立，但是它具有侵害性，不能检查全部的胃肠道，而且需要熟练的操作员和不舒服的肠道准备。无线胶囊内镜使我们能够形象化的看到整个小肠。然而，这种检查也有点侵害性且受到费用和不能够获得组织样本的限制，从而阻碍了内镜技术对疾病活动性的评估。这样，用一个简单、快速、灵敏、特异和非侵入性的标志物去检测和监控炎症性肠病患者是非常有必要的。粪便钙卫蛋白(FC)具有这些特性。

同结肠镜相比，粪便钙卫蛋白和便潜血的检测具有简便、经济、无创性等优点，一定程度上可以避免结肠镜检查的痛苦，弥补患者不能随时复查的不足。为了能够准确测定肠粘膜损伤，很多时候需要同时测定粪便中钙卫蛋白及潜血症状。

目前，检测便潜血的试剂相对较多，但是都是定性检测，没有定量检测的试剂。粪便钙卫蛋白的检测试剂很少，只有酶联免疫和胶体金免疫层析的方法。酶联免疫的方法存在操作繁琐，检测时间长和无法及时进行单人份检测等诸多问题；胶体金免疫层析的方法虽然操作简便，检测时间短，但是存在检测灵敏度较低和检测线性范围窄等因素，检测结果不准确。

发明内容

本发明主要提供了一种测定肠粘膜损伤的联合检测试剂盒及其制备方法，该试剂盒可以同步检测粪便中的钙卫蛋白和便潜血，可以快速简便的判断肠粘膜损伤程度，检测灵敏度高，特异性好。