[发明专利]一种测定膀胱癌的联合检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种测定膀胱癌的联合检测试剂盒，其特征在于：包括免疫层析试纸条，所述免疫层析试纸条包括底板(1)，底板(1)的一面上顺序搭接有吸水垫(2)、检测垫(3)、标记垫(4)、第一样品垫(5)和第二样品垫(6)，检测垫(3)上设有检测线T1、检测线T2、检测线T3和质控线，检测线T1上包被有NMP22单克隆抗体，检测线T2上包被有UBC单克隆抗体，检测线T3上包被有BTA单克隆抗体，质控线上包被有羊抗鼠或羊抗兔IgG，标记垫(4)上包被有量子点标记的NMP22单克隆抗体、量子点标记的UBC单克隆抗体与量子点标记的BTA单克隆抗体的混合物，所述量子点标记的NMP22单克隆抗体为量子点荧光微球标记的NMP22单克隆抗体与量子点修饰物标记的NMP22单克隆抗体混合而成，所述量子点标记的UBC单克隆抗体为量子点荧光微球标记的UBC单克隆抗体与量子点修饰物标记的UBC单克隆抗体混合而成，所述量子点标记的BTA单克隆抗体为量子点荧光微球标记的BTA单克隆抗体与量子点修饰物标记的BTA单克隆抗体混合而成，所述量子点荧光微球的粒径与量子点修饰物的粒径不同；

所述量子点荧光微球为量子点与微球的复合物，量子点荧光微球表面带有基团，其粒径为120-180nm，所述量子点修饰物为量子点表面经基团修饰而成，其粒径为25-60nm，所述量子点为硅、锗、硫化镉、碲化镉、硒化锌、硫化铅、硒化铅、砷化铟、硒化镉或膦化铟，所述微球为聚苯乙烯微球、聚甲基丙烯酸酯微球、聚乙烯甲苯微球或二氧化硅微球；

所述基团为羧基，量子点荧光微球标记的NMP22单克隆抗体与量子点修饰物标记的NMP22单克隆抗体的混合比例为1:0.1-10；量子点荧光微球标记的UBC单克隆抗体与量子点修饰物标记的UBC单克隆抗体的混合比例为1:0.1-10；量子点荧光微球标记的BTA单克隆抗体与量子点修饰物标记的BTA单克隆抗体的混合比例为1:0.1-10。

2.根据权利要求1所述的测定膀胱癌的联合检测试剂盒，其特征在于：检测垫(3)的材质为硝酸纤维素膜，标记垫(4)的材质为玻璃纤维素。

3.根据权利要求1所述的测定膀胱癌的联合检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒对NMP22的检测灵敏度达到0.15ng/ml，对UBC的检测灵敏度达到0.1ng/ml，对BTA的检测灵敏度达到0.1ng/ml。

4.一种权利要求1所述的测定膀胱癌的联合检测试剂盒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(Ⅰ)标记垫(4)的制备

取量子点荧光微球标记的NMP22单克隆抗体与量子点修饰物标记的NMP22单克隆抗体按照1:0.1-10的比例混合，形成量子点标记的NMP22单克隆抗体，取量子点荧光微球标记的UBC单克隆抗体与量子点修饰物标记的UBC单克隆抗体按照1:0.1-10的比例混合，形成量子点标记的UBC单克隆抗体，取量子点荧光微球标记的BTA单克隆抗体与量子点修饰物标记的BTA单克隆抗体按照1:0.1-10的比例混合，形成量子点标记的BTA单克隆抗体，将量子点标记的NMP22单克隆抗体、量子点标记的UBC单克隆抗体与量子点标记的BTA单克隆抗体按照1:1:1的比例混合，将混合液喷涂在玻璃纤维素垫上，干燥，备用；

(Ⅱ)检测垫(3)的制备

取硝酸纤维素膜，间隔划出检测线T1、检测线T2、检测线T3和质控线，检测线T1上包被NMP22单克隆抗体，检测线T2上包被UBC单克隆抗体，检测线T3上包被BTA单克隆抗体，质控线上包被羊抗鼠或羊抗兔IgG，将包被好的硝酸纤维素膜干燥，备用；

(Ⅲ)免疫层析试纸条制备

在底板(1)上依次搭接吸水垫(2)、检测垫(3)、标记垫(4)、第一样品垫(5)和第二样品垫(6)，组装完毕后剪切成条即可；

(Ⅳ)试剂盒组装

将试纸条装入塑料板卡上，扣上上盖，密封保存。