[发明专利]一种以白介素15为活性成分的融合蛋白型药物前体

说明书

本发明涉及一种以白介素15为活性成分的融合蛋白型药物前体，所述的药物前体为融合蛋白，包含如下结构单元：(1)第一结构单元：白介素15(IL15)受体的一个或一个亚基的片段；(2)第二结构单元：具有活性的IL15；(3)位于所述融合蛋白C端的第三结构单元：抗体Fc片段；(4)连接片段1：用于连接所述第一、第二和第三结构单元；(5)位于所述融合蛋白N端的第四结构单元：IL15受体的β亚基的胞外片段；(6)连接片段2：用于连接所述第四结构单元和剩余结构单元。

技术领域

本发明属于医药生物领域，具体而言，涉及一种以白介素15为活性成分的融合蛋白型药物前体。

背景技术

白介素15：1994年,Grabstein等研究者在检测猴肾表皮细胞系cv-1/EBVA上清液中发现了一种能维持CTLL-2细胞增殖的可溶性细胞因子,命名为IL15，即白细胞介素15(interleukin-15，IL15)^[1]。IL-15与IL-2相似，属于4个螺旋细胞因子家族。人IL15的基因定位于5号染色体q25-35。IL15是一种分子量14～15ka的糖蛋白,成熟蛋白由112个氨基酸组成,含有3个可能的N连接糖基化位点。IL15的表达受到严格调控。IL15的mRNA在很多组织和细胞中都可以检测到表达，如纤维组织，肌肉细胞，肾脏细胞，淋巴细胞，肥大细胞，肿瘤细胞等，但成熟的IL15蛋白则主要表达于DC细胞，单核细胞，巨噬细胞和基质细胞中，T细胞不表达。GM-CSF(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor，GM-CSF),interfereons,和TLR可促进IL15的表达。

白介素15受体(IL15R)：IL15R属于造血因子超家族,由α、β(又称CD122)、γ(又称CD132，common gamma chain，γc)3个亚基构成。IL2和IL15共用β链受体。IL2，IL4，IL7，IL9，IL15以及IL21共用γ链受体。IL2和IL15的受体共用β和γc链，但IL2和IL15均有其各自特异性α受体链。人IL15Rα属于I型跨膜蛋白，IL2Rα和IL15Rα都有一个保守的蛋白结合基序(sushi domain)。IL2R有三种不同的复合体：单独IL2Rα与IL2的亲和较低，且不能传递信号；IL2Rβγ异源二聚体以中等亲和力结合IL2并可介导信号传递；IL2Rαβγ异源三聚体以高亲和力结合IL2并介导信号传递。IL15与IL15Rα亲和力比较高(Kd～10^-11M)，但不传递信号。IL15与IL15βγ异源二聚体的亲和力比较中等(Kd～10^-9M)，可传导信号；IL15与IL15αβγ异源三聚体亲和力与前者相似(Kd～10^-9M)，可传导信号。由于IL2和IL15的受体共用β和γ链，因此，IL2和IL15之间有许多相似的生物学功能，如都能促进T细胞，NK细胞增殖^[3]。

IL15与受体的结合：IL15Rα主要表达于DC和单核细胞。在大多数情况下,IL15/IL15Rα以trans-presented的形式与受体结合。即IL-15和IL-15Ra在相同细胞中表达后，在胞内IL-15与IL-15Rα的sushi结构域以高亲和力结合后转运至膜表面，然后与其反应性细胞(如T细胞或NK细胞)膜表面的βγ异源二聚体复合物或αβγ异源三聚体复合物结合，β和γ受体可分别活化下游Jak1和Jak3，导致STAT-3和STAT-5活化，激活级联反应，诱导特异性基因表达。IL15以自分泌的形式作用于效应细胞时，可以cis形式与IL15受体作用，活化下游信号产生效应功能。

IL-15的免疫功能：IL15是一个多效性的细胞因子，可维持和活化天然免疫和适应性免疫反应。包括：

(1)促进CD8+T细胞活化，增殖，活化以及存活；

(2)对记忆性T细胞的活化和维持及其重要；

(3)对NK细胞和NKT发育至关重要，此外和促进NK和NKT细胞活化和增殖；

(4)促进抗肿瘤抗体的产生；