[发明专利]用于检测KRAS突变的引物对和探针的组合产品、组合物、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种引物对和探针的组合产品，包括检测不同KRAS基因第2外显子突变型的LNA荧光探针以及引物；

所述LNA荧光探针的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；

所述引物选自下列引物对中的一对或多对：

其中，所述引物对的正向引物序列中至少存在一个锁核酸；

和/或；

所述LNA荧光探针序列中至少存在一个锁核酸。

2.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述引物对的各个正向引物的3'端第一个核苷酸为锁核酸。

3.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述LNA荧光探针5'端的第9、11、18、23位核苷酸为锁核酸。

4.根据权利要求1所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述LNA荧光探针的5′端标记荧光发射基团，3′端标记淬灭基团。

5.根据权利要求4所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述荧光发射基团选自FAM、HEX、VIC或JOE中的任一种，优选为FAM。

6.根据权利要求4所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述淬灭基团选自TAMRA、BHQ或MGB中的任一种，优选为BHQ，更优选为BHQ3。

7.根据权利要求1-6任一项所述的引物对和探针的组合产品，其特征在于，所述组合产品还包括用于扩增KRAS基因第2外显子野生型序列的Exon2野生型引物；优选的，所述Exon2野生型引物的正向引物和反向引物核苷酸序列分别如SEQ ID NO：10和SEQ ID NO：11所示。

8.一种组合物，其含有权利要求1-7任一项所述的引物对和探针的组合产品。

9.一种试剂盒，其包含权利要求1-7任一项所述的引物对和探针的组合产品，优选还包括荧光定量PCR反应缓冲液、样品处理液、无核酸水、DNA聚合酶、KRAS基因第2外显子突变类型阳性对照序列以及野生型对照序列中的一种或多种。

10.权利要求1-7任一项所述的引物对和探针的组合产品、权利要求8所述的组合物或权利要求9所述的试剂盒在制备用于诊断KRAS突变癌症的试剂或试剂盒中的应用。