[发明专利]检测眼部微量生物样本中CMV感染的试剂盒和方法

权利要求书

1.一种用于检测眼部微量样本CMV感染的试剂盒，其特征在于：包含用于制备眼部微量样本DNA模板的试剂组以及PCR扩增试剂；

所述试剂组包含如下试剂；

裂解缓冲液：含10％SDS的Tris饱和酚,

洗脱缓冲液1：饱和酚:氯仿:异戊醇以体积比25:24:1的混合液；

洗脱缓冲液2：无水乙醇,

洗脱缓冲液3：pH8.0,含1mmol/LEDTA的10mmol/L Tris-HCl溶液；

所述PCR扩增试剂含有以下引物探针组，序列如下：

Primer-F：TCGTGAAACACGCTCGCTTT，

Primer-R：TGGTCGGTACACGGTCCCTT，

探针：GACCCGGTGTTCCTTGGAGA；

以及为每个检测反应设置对照反应的对照模版，具体如下：

阳性对照模版:已知CMV病毒DNA片段，用于对检测体系和仪器的质量控制，保证结果的准确性，避免假阴性结果

阳性对照模版:阳性眼部体液；

空白对照模版：超纯水；

阴性对照模版：阴性眼部液体样本；

弱阳性对照模版：阳性眼部体液的稀释液，其临界值设置在△T＝38-40；

所述眼部微量样本指体积不超过10ul-50ul的液体样本或体积不超过1×1mm的固体类样本；

所述液体样本指眼部分泌物、房水、泪液和/或玻璃体；

所述固体类样本指视网膜、角膜内皮、翼状胬肉、结膜、虹膜和/或眼部肿物。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于，用于每个反应的PCR扩增体系含有：

所述PCR扩增试剂在使用前加入眼部微量样本DNA模板及蒸馏水使反应总体积达到20个体积单位。

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于，用于每个反应的PCR扩增体系含有：

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒,所述体积单位是1微升、1.5微升、2微升或2.5微升。