[发明专利]一种高产EPA高山被孢霉在蛋鸡饲料中的应用

说明书

本发明公开了一种高产EPA高山被孢霉在蛋鸡饲料中的应用，属于微生物技术领域。本发明利用高山被孢霉菌株生产饲料补充剂，通过气升发酵罐培养该菌体使其EPA含量达到1829.2mg/L，ω‑6和ω‑3PUFAs比例约1:1，脂肪酸组成合理，具有很高价值。补充添加该菌体补充剂的蛋鸡所产鸡蛋蛋黄DHA积累达7.31mg/g，每个鸡蛋DHA含量达130mg，蛋黄中ω‑6和ω‑3PUFAs的比值为3.93，该高DHA鸡蛋蛋营养丰富。本发明对于高DHA营养鸡蛋的开发和生产具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种高产EPA高山被孢霉在蛋鸡饲料中的应用，属于微生物技术领域。

背景技术

ω-3多不饱和脂肪酸(PUFAs)是对人体健康有益的重要营养素。临床研究表明ω-3PUFAs中的二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)对哮喘、抑郁症、糖尿病、免疫系统疾病、心血管疾病和癌症等治疗具有作用。然而，哺乳动物不能自身合成EPA和DHA，只能从外界摄取或经延长、脱饱和、β-氧化等过程从前体物α-亚麻酸(ALA)中转化而来，但后者的转化效率极低，不能满足需求。

高山被孢霉(Mortierella alpina)油脂含量丰富，是花生四烯酸(AA)生产的最佳工业化菌株，其发酵生产的AA经FDA认证评估，安全可靠。鸡蛋是日常膳食中营养价值最高的食物之一，其脂肪酸组成丰富，蛋白质含量高，维生素和矿物质含量丰富，但鸡蛋中ω-3PUFAs含量较低，ω-6/ω-3PUFAs比例达12:1以上，远远超过推荐摄入比例(3-5:1)，不能满足膳食营养要求。研究表明蛋鸡可将饲料中的PUFAs转化并富集于蛋黄中，从而改善蛋黄脂肪酸的组成，蛋黄的脂肪酸组成与饲料中的脂肪酸组合和含量密切相关，因此，通过改变饲料脂肪酸组成的方式改善鸡蛋中PUFAs的比例成为近年来研究的热点。发明人前期将高山被孢霉CGMCC No.10295(EPA含量占总脂肪酸6％)按5％和10％添加到蛋鸡日粮中，经过10天补充喂养，10％添加组蛋黄DHA含量比对照组提高了3倍，ω-6/ω-3的比例由13:1降低到8:1[陈永泉，陈海琴，陈卫，代鹏，王鸿超，杨芹，赵建新，顾震南，张灏，一种高山被孢霉CCFM442菌株及其用途，ZL201510062057.9]。此外，发明人还构建了一株过表达来源于寄生疫霉的ω-3脱饱和酶oPpFADS17基因的高山被孢霉CGMCC No.11820，其经过常温培养下后EPA的产量达到1197.3mg/L，占总脂肪酸(TFA)含量的31.5％，对AA的转化率达77.6％[陈海琴，陈永泉，陈卫，梅甜甜，顾震南，张灏，一株过表达来源于寄生疫霉的ω-3脱饱和酶的重组高山被孢霉、其构建方法及应用，CN 201610184669.X]。

发明内容

本发明首先提供了一种发酵培养高山被孢霉CGMCC No.11820制备蛋鸡饲料添加剂的方法，所述方法是通过分批补料发酵制备高山被孢霉CGMCC No.11820，将所得高山被孢霉CGMCC No.11820具体作为蛋鸡饲料添加剂。将该高山被孢霉CGMCC No.11820添加到蛋鸡饲料中可以使鸡蛋中的DHA含量提高，该高DHA含量的鸡蛋有益于人体健康。

在本发明的一种实施方式中，培养所述高山被孢霉所使用的发酵培养基为葡萄糖30～50g/L、豆粕提取物45～50g/L、一水合磷酸二氢钾0.8～1.2g/L、硝酸钾4～5g/L、七水合硫酸镁0.25～0.3g/L。

在本发明的一种实施方式中，培养所述高山被孢霉CGMCC No.11820所使用的发酵培养基为葡萄糖30g/L，豆粕提取物50g/L，一水合磷酸二氢钾1g/L，硝酸钾5g/L，七水合硫酸镁0.25g/L。所述豆粕提取物制备方法为以重量计，取豆粕1份，加入5份水，煮沸并保持沸腾状态20min，所得产物用双层纱布过滤，弃去滤渣，所得滤液冷却至室温，即为所述豆粕提取物。