[发明专利]一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法

权利要求书

1.一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)获取兔上皮鳞癌VX2组织块；

(2)建立兔舌癌模型；

(3)建立兔颈部淋巴结转移模型；

(4)建立兔颈部高转移淋巴结模型；

(5)使用荧光显影剂对肿瘤转移淋巴结进行实时可视化诊断；

(6)采集肿瘤转移淋巴结荧光光谱数据，根据光谱数据划分阈值，判断转移与非转移淋巴结。

2.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(3)的具体步骤包括：

①将舌癌荷瘤兔进行培养；

②饲养15天-45天后筛选颈部发生淋巴结转移的荷瘤兔。

3.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(4)的具体步骤包括：

①无菌摘取发生颈部淋巴结转移的荷瘤种兔的颈部转移淋巴结，选取淋巴结中鱼肉样组织，使用眼科剪将其剪碎至0.5mm³-1.5mm³，形成淋巴结癌组织块悬浊液；

②将取得的组织块悬浊液接种在兔舌右侧中间部位舌缘处，继续建立兔舌癌模型；

③待荷瘤兔出现淋巴结转移后，重复上述步骤，将转移淋巴结制作成组织块，接入下一批新西兰大白兔舌部；

④通过上述步骤不断筛选具有高转移特性的淋巴结组织块进行接种，以形成高淋巴结转移的兔舌癌模型。

4.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(5)的具体步骤包括：

①取有转移淋巴结的新西兰大白兔，经耳缘静脉注射5-氨基酮戊酸(5-ALA)，避光放置；

②避光结束后，将淋巴结转移兔麻醉，打开颈部皮肤，暴露颈部淋巴结；

③使用激光照射开放部位；

④使用相机记录激发光图像。

5.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(5)所使用的5-ALA剂量为5mg/kg-50mg/kg。

6.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(5)的避光时间为2小时-10小时，所使用的激光峰值在350nm-450nm。

7.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(5)所使用的激光光源的功率为10mw/cm²-100mw/cm²。

8.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(5)所使用的激光光源距离样本的距离为10cm-80cm。

9.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(6)的具体步骤包括：

①使用激光激发颈部淋巴结；

②使用光谱仪采集所有的淋巴结的光谱数值，记录不同光谱数值；

③根据荧光数值对所有的淋巴结进行分类，划分阈值，区分转移与非转移淋巴结。

10.如权利要求1所述的一种肿瘤淋巴结高转移模型的建立及荧光快速检测方法，其特征在于，所述步骤(6)使用的激光峰值在350nm-450nm，点光源到淋巴结的探测距离为2cm-10cm。