[发明专利]一种用于诊断儿童巨细胞病毒感染的试剂在审
申请号: | 201810446595.1 | 申请日: | 2018-05-11 |
公开(公告)号: | CN108866239A | 公开(公告)日: | 2018-11-23 |
发明(设计)人: | 王莹莹;范祖慧 | 申请(专利权)人: | 王莹莹 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 266034 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 尿液 巨细胞病毒感染 诊断 冰浴 沉淀 蒸馏水 预处理 聚乙二醇 抗体滴度 临床标本 细胞碎片 上清液 抑制剂 抗体 扩增 悬液 去除 加热 冷却 悬浮 升高 病毒 采集 标本 | ||
1.一种用于诊断儿童巨细胞病毒感染的试剂,其特征在于:包含患者的尿液,所述尿液经2500r/min离心8-10min,以去除细胞碎片,收集上清液,由于尿液中含有PCR抑制剂,则用聚乙二醇进行预处理,50μl尿上清与50μl 20%聚乙二醇和25μl 2mol/L NaCl混合,置冰浴中5-6h;15000r/min离心25-30min收集沉淀;再于6400r/min离心2-3min;尽可能吸去上清,将沉淀悬浮于蒸馏水中;该悬液可直接用于PCR扩增;扩增时应于100℃加热8-10min,迅速置冰浴中冷却即可。
2.根据权利要求1所述的一种用于诊断儿童巨细胞病毒感染的试剂,其特征在于:包含患者的尿液,所述尿液经2500r/min离心8min,以去除细胞碎片,收集上清液,由于尿液中含有PCR抑制剂,则用聚乙二醇进行预处理,50μl尿上清与50μl 20%聚乙二醇和25μl 2mol/LNaCl混合,置冰浴中5h;15000r/min离心25min收集沉淀;再于6400r/min离心2min;尽可能吸去上清,将沉淀悬浮于蒸馏水中;该悬液可直接用于PCR扩增;扩增时应于100℃加热8min,迅速置冰浴中冷却即可。
3.根据权利要求1所述的一种用于诊断儿童巨细胞病毒感染的试剂,其特征在于:包含患者的尿液,所述尿液经2500r/min离心10min,以去除细胞碎片,收集上清液,由于尿液中含有PCR抑制剂,则用聚乙二醇进行预处理,50μl尿上清与50μl 20%聚乙二醇和25μl2mol/L NaCl混合,置冰浴中6h;15000r/min离心30min收集沉淀;再于6400r/min离心3min;尽可能吸去上清,将沉淀悬浮于蒸馏水中;该悬液可直接用于PCR扩增;扩增时应于100℃加热10min,迅速置冰浴中冷却即可。
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