[发明专利]肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒及制法

说明书

本发明公开了一种肿瘤关联糖蛋白‑72免疫层析电化学检测试剂盒及制法。本发明的试剂盒本发明从提高检测灵敏度与缩短检测时间出发，将免疫层析技术与电化学分析技术优势相结合提供了，即免疫层析技术特异性强、简单快速、易于操作、结果容易判读等优点，又电化学分析法具有灵敏度较高、准确度高、测量范围宽、仪器设备较简单等特点的方便快速的肿瘤关联糖蛋白‑72检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒操作简单方便，灵敏度大幅提高，检测时间缩短至10～20分钟。

技术领域

本发明属于肿瘤关联糖蛋白检测技术，特别涉及肿瘤关联糖蛋白-72。

背景技术

肿瘤相关糖蛋白-72(TAG-72)是一种高分子质量的类黏液糖蛋白，主要表达在人结肠癌、胃癌、卵巢癌、乳腺癌及肺癌中。其高表达常伴有恶性预后，几乎不表达于正常上皮及良性病变中。已有研究表明TAG-72对多种恶性肿瘤有提示诊断价值。

现有检测肿瘤相关糖蛋白-72的手段是ELISA法。检测酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。常用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

酶联免疫吸附试验法虽然灵敏度较好，但其对实验人员操作技术要求高，操作过程有些繁琐，检测时间长达几个小时。

发明内容

为了解决上述现有各种方法的不足，本发明的目的是提供肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒及制法。本发明从提高检测灵敏度与缩短检测时间出发，将免疫层析技术与电化学分析技术优势相结合提供了，即免疫层析技术特异性强、简单快速、易于操作、结果容易判读等优点，又电化学分析法具有灵敏度较高、准确度高、测量范围宽、仪器设备较简单等特点的方便快速的肿瘤关联糖蛋白-72检测试剂盒及制备方法。

根据本发明的一方面提供了肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒，该试剂盒包括：肿瘤关联糖蛋白-72检测试纸条，肿瘤关联糖蛋白-72检测试纸条包含亚甲基蓝标肿瘤关联糖蛋白-72抗体垫、样品垫、C线和T线，C线和T线划线或点样于硝酸纤维素膜上不同位置，硝酸纤维素膜粘贴于底板上，底板一端粘贴加厚吸水纸，底板另一端粘贴有所述亚甲基蓝标记肿瘤关联糖蛋白-72抗体垫和样品垫，肿瘤关联糖蛋白-72检测试纸条还包含工作电极、参比电极、辅助电极贴片贴合于硝酸纤维素膜上T线抗体区。其中样品垫即玻璃纤维素膜。

根据本发明的一方面提供了肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒，其中上述亚甲基蓝标肿瘤关联糖蛋白-72抗体垫和样品垫是有接触的即重叠约2毫米、亚甲基蓝标肿瘤关联糖蛋白-72抗体垫和硝酸纤维素膜有接触的即重叠约2毫米。抗体垫、样品垫还有吸水纸为柔性材质和底板接触贴合的。

根据本发明的另一方面提供了肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒，该肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒还包括反应溶液，样本稀释溶液，清洗液。

根据本发明的另一方面提供了肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒，该亚甲基蓝偶联肿瘤关联糖蛋白-72抗体垫由亚甲基蓝偶联肿瘤关联糖蛋白-72抗体、抗体垫结合稀释液和玻璃纤维素膜制成。

根据本发明的另一方面提供了肿瘤关联糖蛋白-72免疫层析电化学检测试剂盒，其中亚甲基蓝偶联肿瘤关联糖蛋白-72抗体中亚甲基蓝和肿瘤关联糖蛋白-72的摩尔比为5:1～50:1，最佳为30:1。