[发明专利]桂郁金PCR鉴定试剂盒及鉴定方法有效
| 申请号： | 201810459875.6 | 申请日： | 2018-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN108588260B | 公开（公告）日： | 2019-11-29 |
| 发明（设计）人： | 李敏;洪露;韩笑杰 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 33201 杭州天正专利事务所有限公司 | 代理人： | 黄美娟;李世玉<国际申请>=<国际公布> |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 郁金 试剂盒 中药 特异性引物 临床应用 品种鉴定 质量监管 重大意义 选种 采收 伪品 真伪 鉴别 育种 储存 种植 环节 应用 销售 打击 | ||
【权利要求书】：
1.一种桂郁金PCR鉴定试剂盒，其特征在于所述试剂盒中的特异性引物为GYJ1和GYJ2：
GYJ1:5’-CTTCAACAACAGCACGACAA-3’
GYJ2:5’-GCTCAACAAACCCAAATACG-3’。
2.如权利要求1所述桂郁金PCR鉴定试剂盒，其特征在于所述的桂郁金PCR鉴定试剂盒的组成为：
3.一种利用权利要求1所述桂郁金PCR鉴定试剂盒对桂郁金进行鉴定的方法，其特征在于所述方法为：
(1)模板DNA的提取和质量鉴定：提取供试品DNA作为PCR的模板；以电泳法检测模板DNA的质量，条带清晰无弥散的，即为符合PCR反应的模板DNA；
(2)PCR鉴定：利用桂郁金PCR鉴定试剂盒中的特异性引物GYJ1和GYJ2，进行PCR扩增：
PCR反应溶液：
将PCR反应溶液放入PCR自动扩增仪器中进行PCR扩增反应，反应程序设置为：94℃预变性5min，94℃变性45s，52～56℃复性45s，72℃延伸1min，32个循环，最后72℃延伸7min；
(3)PCR产物进行电泳检测：取出PCR扩增产物5μL与加样缓冲液1μL混合，用1.2％琼脂糖凝胶电泳检测扩增结果，在1049bp处出现扩增条带的为桂郁金。
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