[发明专利]神经组织工程化的角蛋白纤维-神经生长因子复合支架

权利要求书

1.一种角蛋白纤维-神经生长因子复合支架的制备方法，包括如下步骤：

（a）用酸性溶液处理角蛋白纤维，破坏最表面表皮层，暴露出内部皮质层，得到处理后角蛋白纤维；

（b）将神经生长因子加载于所述处理后角蛋白纤维上，即获得角蛋白纤维-神经生长因子复合支架；

步骤（a）中，所述用酸性溶液处理角蛋白纤维是按照包括如下步骤的方法进行的：将所述角蛋白纤维置于8M的酸性溶液中，37℃浸泡30min。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（a）中，在用酸性溶液处理所述角蛋白纤维之后还包括如下步骤：将所述角蛋白纤维先后用蒸馏水和PBS缓冲溶液进行冲洗，37-50℃烘箱中烘干。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（b）中，在将所述神经生长因子加载于所述处理后角蛋白纤维上之前还包括利用体积分数为75%的酒精对所述处理后角蛋白纤维进行消毒的步骤。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：利用体积分数为75%的酒精对所述处理后角蛋白纤维进行消毒是按照包括如下步骤的方法进行的：在无菌条件下，将所述处理后角蛋白纤维浸泡于体积分数为75%的酒精中10-20min，之后用PBS缓冲溶液进行冲洗。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（b）中，将所述神经生长因子加载于所述处理后角蛋白纤维上是通过用交联剂对所述神经生长因子和所述处理后角蛋白纤维进行交联来实现。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（b）中，进行所述交联时采用的交联用缓冲溶液和所述交联剂的配比为10mL：（20-100mg）。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（b）中，进行所述交联时采用的所述神经生长因子和所述处理后角蛋白纤维的质量比为1:（2000-5000）。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤（b）中，是按照包括如下步骤的方法对所述神经生长因子和所述处理后角蛋白纤维进行交联的：

（b1）将所述处理后角蛋白纤维置于交联用缓冲溶液中，然后加入所述交联剂，在室温避光环境下震荡24-48h；

（b2）4℃下将经步骤（b1）处理过的所述处理后角蛋白纤维加入到预冷的0.1M pH 7.2的PBS缓冲溶液中，再加入所述神经生长因子，在4℃避光环境下震荡反应12-24h；

所述处理后角蛋白纤维、所述交联用缓冲溶液、所述交联剂、所述预冷的0.1M pH 7.2的PBS缓冲溶液和所述神经生长因子的配比为1mg：10mL：（20-100mg）：10mL：（200-500ng）。

9.根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于：所述角蛋白纤维为毛发。

10.利用权利要求1-9中任一所述方法制备得到角蛋白纤维-神经生长因子复合支架。

11.权利要求10所述的角蛋白纤维-神经生长因子复合支架在如下任一中的应用：

（A1）制备用于修复神经系统损伤的产品；

（A2）制备用于治疗神经系统相关疾病的产品；

（A3）制备用于促进神经干细胞存活的产品；

（A4）制备用于诱导神经干细胞定向向神经元分化的产品；

（A5）制备用于增加神经干细胞表面Trk A受体的表达量的产品。