[发明专利]铁皮石斛的组织培养方法在审
| 申请号： | 201810464480.5 | 申请日： | 2018-05-16 |
| 公开（公告）号： | CN108684524A | 公开（公告）日： | 2018-10-23 |
| 发明（设计）人： | 陶胜;古飞鸣 | 申请（专利权）人： | 芜湖市三山区绿色食品产业协会 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 241008 安徽*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 铁皮石斛 组织培养 生根培养基 诱导培养基 增殖培养基 外植体 原球茎 增殖苗 土豆泥 水解乳蛋白 活性炭 椰汁 生根培养 诱导培养 增殖培养 链霉素 牛肉汁 腺嘌呤 茎芽 叶酸 幼苗 维生素 消毒 培育 | ||
1.一种铁皮石斛的组织培养方法，其特征在于，所述组织培养方法包括：
1）将铁皮石斛的茎芽进行消毒以得到外植体；
2）将所述外植体置于诱导培养基中进行诱导培养以得到原球茎；
3）将所述原球茎置于增殖培养基中进行增殖培养以得到增殖苗；
4）将所述增殖苗置于生根培养基中进行生根培养以得到铁皮石斛的幼苗；
其中，所述诱导培养基包括B5培养基、0.8-1.2mg/L的6-BA、0.1-0.3mg/L的IAA、0.01-0.05mg/L的腺嘌呤、0.01-0.03mg/L的叶酸、0.04-0.06mg/L的维生素B2；
所述增殖培养基包括B5培养基、0.2-0.5mg/L的6-BA、0.05-0.1mg/L的IBA、0.05-0.08mg/L的链霉素、15-20g/L的土豆泥、4-8g/L的椰汁；
所述生根培养基包括1/2 B5培养基、0.4-0.8mg/L的CPA、0.02-0.06mg/L的GA3、0.01-0.05mg/L的NAA、0.2-0.4mg/L的水解乳蛋白、2-6g/L的牛肉汁、7-10g/L的活性炭。
2.根据权利要求1所述的组织培养方法，其中，所述诱导培养基、增殖培养基、生根培养基均满足以下条件：pH为5.3-5.5。
3.根据权利要求1所述的组织培养方法，其中，所述诱导培养基、增殖培养基、生根培养基的pH的调节采用缓冲溶液的方式进行。
4.根据权利要求1所述的组织培养方法，其中，所述诱导培养基、增殖培养基以及生根培养基均含有6.5-7.0g/L的琼脂和25-30g/L的蔗糖。
5.根据权利要求1-4中任意一项所述的组织培养方法，其中，所述诱导培养的条件为：在光暗交替的情形下进行，光照采用白炽灯和蓝光灯同时存在下进行，培养时间为10-15天；光暗交替条件为：光照时间为12-14h/天，黑暗时间为10-12h/天，光照强度为1700-1900lux，培养温度为21-23℃，相对湿度为50-60%。
6.根据权利要求1-4中任意一项所述的组织培养方法，其中，所述增殖培养的条件为：在光暗交替的情形下进行，光照采用白炽灯和紫光灯同时存在下进行，培养时间为15-20天；光暗交替条件为：光照时间为12-14h/天，黑暗时间为10-12h/天，光照强度为2000-2100lux，培养温度为21-23℃，相对湿度为50-60%。
7.根据权利要求1-4中任意一项所述的组织培养方法，其中，所述生根培养的条件为：在光暗交替的情形下进行，光照采用自然光，培养时间为7-10天；光暗交替条件为：光照时间为12-14h/天，黑暗时间为10-12h/天，光照强度为2000-2100lux，培养温度为21-23℃，相对湿度为50-60%。
8.根据权利要求1-4中任意一项所述的组织培养方法，其中，在步骤1）中，所述灭菌消毒具体为：先将所述茎芽置于60-70重量%酒精水溶液中浸泡30-60s，接着将其置于3-5重量%次氯酸钠水溶液中浸泡3-4min，最后通过蒸馏水进行清洗3-5次。
9.根据权利要求1-4中任意一项所述的组织培养方法，其特征在于，在步骤1）中，所述外植体的长度为0.4-0.6cm。
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