[发明专利]铁皮石斛的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种铁皮石斛的组织培养方法，该组织培养方法包括：1）将铁皮石斛的茎芽进行消毒以得到外植体；2）将外植体置于诱导培养基中进行诱导培养以得到原球茎；3）将原球茎置于增殖培养基中进行增殖培养以得到增殖苗；4）将增殖苗置于生根培养基中进行生根培养以得到铁皮石斛的幼苗；其中，诱导培养基包括B5培养基、6‑BA、IAA、腺嘌呤、叶酸、维生素B2；增殖培养基包括B5培养基、6‑BA、IBA、链霉素、土豆泥、椰汁；生根培养基包括1/2 B5培养基、CPA、GA₃、NAA、水解乳蛋白、牛肉汁、活性炭。该组织培养方法能够高效地培育出铁皮石斛。

技术领域

本发明涉及组织培养基，具体地，涉及一种铁皮石斛的组织培养方法。

背景技术

铁皮石斛是一种喜阴凉的多年生草本植物，喜在温暖、潮湿、以年降雨量1000毫米以上、半阴半阳的环境，1月平均气温高于8℃的亚热带深山老林中生长为佳，适宜生长温度为15到28度，适宜生长空气湿度为60%以上，对土肥要求不甚严格，野生多在疏松且厚的树皮或树干上生长，有的也生长于石缝中。铁皮石斛属气生根系，主要要求根部通透性好，采用的基质最好能通风透气滤水，在适宜的温度湿度下，生长速度快，生存能力非常强。每年春末夏初，二年生茎上部节上抽出花序，开花后从茎基长出新芽发育成茎，秋冬季节进入休眠期。

铁皮石斛的平均自然结实率仅为0.31%，其中以开花当天萼片还没完全展开时的人工授粉结实率最高，铁皮石斛的自然授粉成功率仅为30%左右，同时铁皮石斛的野生种子的成活率很低；综上几种因素进而导致了铁皮石斛在繁殖过程中存在着较大困难。

发明内容

本发明的目的是提供一种铁皮石斛的组织培养方法，该组织培养方法能够高效地培育出铁皮石斛。

为了实现上述目的，本发明提供了一种铁皮石斛的组织培养方法，该组织培养方法包括：

1）将铁皮石斛的茎芽进行消毒以得到外植体；

2）将外植体置于诱导培养基中进行诱导培养以得到原球茎；

3）将原球茎置于增殖培养基中进行增殖培养以得到增殖苗；

4）将增殖苗置于生根培养基中进行生根培养以得到铁皮石斛的幼苗；

其中，诱导培养基包括B5培养基、0.8-1.2mg/L的6-BA、0.1-0.3mg/L的IAA、0.01-0.05mg/L的腺嘌呤、0.01-0.03mg/L的叶酸、0.04-0.06mg/L的维生素B2；

增殖培养基包括B5培养基、0.2-0.5mg/L的6-BA、0.05-0.1mg/L的IBA、0.05-0.08mg/L的链霉素、15-20g/L的土豆泥、4-8g/L的椰汁；

生根培养基包括1/2 B5培养基、0.4-0.8mg/L的CPA、0.02-0.06mg/L的GA₃、0.01-0.05mg/L的NAA、0.2-0.4mg/L的水解乳蛋白、2-6g/L的牛肉汁、7-10g/L的活性炭。

在上述技术方案中，本发明通过调整各诱导培养基、增殖培养基、生根培养基中的组分和含量，进而使得该方法能够快速、高效地通过组织培养得到铁皮石斛，进而能够实现铁皮石斛的大面积种植。

本发明的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。