[发明专利]传染性法氏囊病毒病毒样颗粒的制备及其应用在审
| 申请号： | 201810464623.2 | 申请日： | 2018-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN108624611A | 公开（公告）日： | 2018-10-09 |
| 发明（设计）人： | 陈博;金梅林;徐高原;张娟;李冉;杨应立 | 申请（专利权）人： | 武汉科前生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N7/04;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 龚莹莹 |
| 地址： | 430*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 病毒样颗粒 传染性法氏囊病毒 制备 基因工程疫苗 法氏囊病毒 原核表达 高效价 抗原 效价 应用 生产 | ||
【权利要求书】：
1.一种传染性法氏囊病毒病毒样颗粒的制备方法，包括如下步骤：
1）将452VP2克隆至pET28a载体上，而获得重组质粒pET28a-452，所述的452VP2的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示，编码的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示；
2）452VP2的诱导表达。
2.将pET28a-452转入大肠杆菌表达菌株Rosetta(DE3)，使用IPTG诱导表达重组蛋白，收集诱导后的菌株；
3）使用组装缓冲液重悬菌体，菌体破碎处理后，离心去除不可溶蛋白，保留可溶性上清，即得传染性法氏囊病毒VLP；
所述的组装缓冲液的配方：0.1 M 磷酸盐缓冲液、0.9% 氯化钠、pH7.4。
3.权利要求1所述的方法在制备法氏囊病毒疫苗中的应用；
根据权利要求2所述的应用，将制备的传染性法氏囊病毒VLP溶液通过固定化多粘菌素B树脂，得到低内毒素VLP后，再制备疫苗。
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