[发明专利]鱼胶原低聚肽的制备方法

说明书

本发明公开了鱼胶原低聚肽的制备方法，具体为：将鱼皮切碎后组织捣碎，加入氧氧化钠溶液中，浸泡并不断搅动，然后水洗至中性，再加入异丙醇溶液浸泡，清洗至中性后过滤，充分沥干，匀浆，备用；将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖，脱腥，然后加入β‑环糊精进行超高压脱腥处理得脱腥鱼皮匀浆；调节脱腥匀浆的pH，加入复合蛋白酶、十八酸钠和四丁基溴化铵，超声波酶解，酶解过程中用纳滤膜纳滤，纳滤液喷雾干燥，即得鱼胶原低聚肽。有益效果为：本发明制备方具有投入低、操作简单、胶原蛋白降解效果好、胶原低聚肽得率高、感官接受度较高的优势，易于工业化规模生产，具有良好的应用价值和市场潜力。

技术领域

本发明涉及生物活性成分技术领域，特别涉及鱼胶原低聚肽的制备方法。

背景技术

胶原（Collagen）是细胞外基质（ECM）的一种结构蛋白，含有一个或几个由α链组成的三螺旋结构的区域，又称胶原域。胶原是动物组织中一类重要的结构蛋白，由动物的成纤细胞合成的高分子纤维型蛋白质，广泛存在于动物肌腱、韧带、软骨、皮肤及其他结缔组织中，起着支撑、营养、免疫、保护、信息传递等重要生理功能。各类胶原的结构具有显著共性，其一级结构表现为甘氨酰-脯氨酰-Y、甘氨酰-脯氨酰-羟脯氨酰、甘氨酰-X-Y（其中X、Y代表除脯氨酰和甘氨酰以外的任何其他氨基酸残基）的三肽重复序列。胶原含有其他蛋白质中少见的羟脯氨酸和羟赖氨酸，也有较多的脯氨酸和赖氨酸，缺乏色氨酸，芳香氨基酸和半胱氨酸含量较少。二级结构表现为特殊的三股螺旋结构，是由三条左手螺旋的α-肽链以平行、右旋形式，缠绕形成绳索状右手超螺旋结构。三级结构揭示胶原肽链除次级键作用外，分子内与分子间还存在醇醛缩合、醛醇组氨酸及醛胺缩合三种交联形式。四级结构表现为原胶原分子依照一定规则平行排列成束，首尾错列四分之一，以共价键搭接形成稳定的胶原纤维，再进一步聚集成更大的纤维束。

鱼类胶原的热稳定性较低并呈现有鱼种特异性，即暖水鱼胶原较冷水性鱼胶原的热稳定性高，这与其生存环境有关，也与羟脯氨酸含量因鱼种、组织部位不同而不同有关。与陆生动物相比，鱼胶原氨基酸组成及含量有共性的一面，又存在显著特殊性，其蛋氨酸含量较陆生动物多而脯氨酸、羟脯氨酸含量相对较少。而羟脯氨酸、脯氨酸的含量越低，其胶原结构被破坏的温度越低，这是因为羟脯氨酸在联接肽链及稳定胶原三股螺旋结构方面起着重要作用。近年来，各类胶原在美容保健、医药卫生、食品领域、组织材料工程及生物材料等中高端领域显现出良好的应用发展前景。胶原肽作为一种生物活性肽，是介于蛋白质和氨基酸之间的分子聚合物。通常将由2～10个氨基酸构成的胶原肽称为胶原低聚肽（Collagenous Oligopeptide），其分子量为1000Da以下。由10～100个氨基酸构成的称为胶原多肽。现代研究认为，多肽较蛋白质而言，更易于消化吸收、能迅速给机体提供能量、无蛋白质变性、低过敏性、良好的水溶性等特点，而小分子低聚肽可以无需消化，被机体直接吸收利用，具有多重生物活性功能。近年来，国内外鱼胶原肽的各类相关研究迅速发展起来。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取速率快，鱼胶原低聚肽得率和活性高、感官接受度好、品质佳的鱼胶原低聚肽的制备方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

鱼胶原低聚肽的制备方法，包括预处理、脱腥、酶解，其具体步骤为：

预处理：将鱼皮切碎后组织捣碎，按料液比为1:4-6g/mL将鱼皮加入浓度为0.08-0.13M的氧氧化钠溶液中，浸泡并不断搅动，1.5-2.5h后用流动水冲洗至中性，再按料液比为1:1.5-2.5g/mL加入浓度为2-5%的异丙醇溶液，浸泡10-15h后用蒸馏水反复清洗至中性后纱布过滤，充分沥干，再按重量比为1:5-7向沥干的鱼皮中加入去离子水，匀浆，备用，鱼皮胶原多肽在制备前，因其中含有很多杂蛋白及脂肪，所以要先进行前处理来去除这些杂蛋白、脂肪等，可减少此类物质对鱼皮胶原多肽的影响；