[发明专利]一种外泌体、外泌体的制备方法及其在制备皮肤浅表性肿瘤的药物中的应用

权利要求书

1.一种外泌体，其特征在于，所述外泌体为由Trail基因转染的大肠杆菌来源的外泌体，所述外泌体中还加入靶向黑色素瘤细胞的多肽iRGD和多肽PEP以及红外光热剂吲哚菁绿ICG，

其中多肽iRGD为棕榈酸修饰的序列为CRGDRGPDC的氨基酸，PEP为棕榈酸修饰的序列为KWRNMGGAGIVRRADRAAVV的氨基酸。

2.根据权利要求1所述的一种外泌体，其特征在于，所述外泌体的制备方法包括如下步骤：

步骤（1）：用热激法将含有Trail蛋白的质粒导入大肠杆菌，然后进行培养；

步骤（2）：收集步骤（1）中培养液，采用差速离心法收集外泌体，即得到载有Trail蛋白的外泌体；

步骤（3）：在步骤（2）获得的载有Trail蛋白的外泌体中加1~8 mg/mL溶菌酶，置于20~37℃摇床中，80~200 rpm振荡1~3 h，即可获得；

步骤（4）：向外泌体中分别加入靶向黑色素瘤细胞的10~30 μg/mL多肽iRGD和10~30 μg/mL多肽PEP，置于20~37℃摇床中，80~200 rpm振荡1~3 h；于4 ℃，离心，弃去上清，得到iRGD接枝的外膜囊泡和PEP多肽接枝的外膜囊泡；

步骤（5）：向步骤（1）得到的外膜囊泡中加入0.1-2mg/mL红外光热剂吲哚菁绿ICG，置于20~37℃摇床中，80~200 rpm振荡1~3 h；

步骤（6）：离心收获即得。

3.根据权利要求1或2所述的外泌体在制备治疗皮肤浅表性黑色素瘤的药物中的应用。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所制备得到的药物的给药方式为透皮给药。

5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述步骤（4）和（6）中的离心的离心力为100000g~200000g。