[发明专利]用于人ApoE基因分型的引物探针组合及使用方法在审
| 申请号： | 201810478466.0 | 申请日： | 2018-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN110499363A | 公开（公告）日： | 2019-11-26 |
| 发明（设计）人： | 孙慧;滕飞;蒋明;于丽华;房健民 | 申请（专利权）人： | 同济大学苏州研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/6883 | 分类号： | C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215000 江苏省苏州*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分型检测 等位基因特异性 扩增反应条件 点突变基因 野生型序列 封闭引物 高灵敏度 基因技术 疾病关系 结果判读 序列设计 样品基因 引物探针 低成本 多态性 分型 富集 引物 突变 判定 便利 检测 研究 | ||
1.用于人ApoE基因分型的特异性引物探针组合，该组合包含以下引物探针序列：
ApoE2分型检测的引物探针组合
F-ApoE2：CGATGACCTGCAGAAGT
R-ApoE2：AGGCGCTCGCGGATGG
ApoE2-B:TGCAGAAGCGCCTGGCA
ApoE2-P： Fam-ACCAGGCCGGGGCCCGCA-BHQ1
ApoE4分型检测的引物探针组合
F1-ApoE4：CACGGCTGTCCAAGGAG
R1-ApoE4：CACCAGGaGGCCGCG
ApoE4-B1：GGCGGCCGCACACGT
ApoE4-P1：Fam-CTCCATGTCCGCGCCCAGCCA-BHQ1。
2.根据权利要求1所述的引物、探针组合，其特征在于，所述封闭引物其3’端修饰有磷酸基团。
3.根据权利要求1所述的两种引物、探针组合，其特征在于，还分别包括内控引物和内控探针：
F-actinH：ATCGCCGCGCTCGTC
R-actinH：CCGGGGGGCATCGTCG
P-actinH: JOE-CAACGGCTCCGGCATGTGCA-BHQ1。
4.一种ApoE基因分型检测的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1～3任一项所述的引物、探针组合，和荧光定量PCR试剂。
5.权利要求1所述的引物探针组合，其特征在于以权利要求1～4任一项所述的引物、探针组合对待测样品进行扩增；所述扩增包括高温扩增和低温扩增两个阶段；高温扩增阶段和低温扩增阶段的退火温度相差4～6℃。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述扩增的条件包括：
。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述扩增的反应体系中包括：
。
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